[发明专利]一种海洋微生物防污涂料的制备方法

摘要

本发明涉及一种海洋微生物发酵产物用于制备海洋微生物防污涂料的方法，实现利用生物原料制备防止海洋生物附着的防污涂料，属于生物污损防护技术领域，包括防污微生物制备、防污蛋白酶制备和微生物防污涂料的制备三个工艺步骤，先将藤壶、贻贝匀浆处理，取匀浆放入液体培养基琼脂板上划线分离培养得防污微生物；再将微生物由斜面培养基接入到液体种子培养基中和发酵培养基中培养，经处理后减压冷冻干燥得目标活性物防污蛋白酶；最后依次向氯化橡胶溶液中加入松香搅拌均匀后加入膨润土，然后用电动搅拌均匀后加入活性物防污蛋白酶，混合均匀得微生物防污涂料，其工艺过程简便，生产成本低，防污损效果好，且没有环境污染。

主权项

1. 一种海洋微生物防污涂料的制备方法，包括防污微生物制备、防污蛋白酶制备和微生物防污涂料制备三个工艺步骤，其特征在于防污微生物制备是先将从海洋环境中取得的藤壶、贻贝用匀浆器进行匀浆处理，取匀浆放入液体培养基在25℃富集培养24小时，将富集培养的菌液在琼脂板上进行划线分离培养24小时后观察培养皿，挑取有水解圈生成的菌落进行进一步分离纯化，直到细胞菌落形态稳定一致、细胞显微观察形态一致即得到防污微生物；防污蛋白酶制备是将微生物纯菌落由斜面培养基接入到液体种子培养基中培养24小时后，将种子培养基接入到发酵培养基中进行培养，转速为100-180转/min，发酵48小时以后，3000rpm/min离心15-30分钟；上清液用60％硫酸铵饱和溶液盐析，静置24小时，8000rpm/min离心30分钟；离心后的沉淀层析，流动相为水，流速为0.6ml/min，每300秒收集一管；层析后将相同组分合并，减压冷冻干燥即制得目标活性物防污蛋白酶；微生物防污涂料制备是按重量百分比依次称取氯化橡胶70-80％，松香12-17％，膨润土1-4％，活性物防污蛋白酶4-10％，向氯化橡胶溶液中加入松香，搅拌均匀后加入膨润土，然后用电动搅拌器搅拌均匀，最后加入活性物防污蛋白酶，混合均匀即制得微生物防污涂料。