[发明专利]一种利用红豆杉侧根增殖生产紫杉醇的方法

摘要

本发明公开了一种利用红豆杉侧根增殖生产紫杉醇的方法，步骤为：①选择1－2年生红豆杉枝条做插穗材料；②插穗依次插入KMnO₄溶液、蔗糖溶液、植物生长激素中浸泡后转入扦插基质；③待根生长后拔出插穗，激素处理后再继续转入扦插基质；④剪取一定量的侧根用于生产紫杉醇；⑤在≤55℃条件下进行控温干燥，然后经过粉碎、有机溶剂提取浓缩、柱层析、回收溶剂、结晶、干燥得到紫杉醇纯品；或将剪取的红豆杉侧根培养于改良Murashige&Skoog液体培养基中，培养基中添加抑菌剂，并采用诱导子进行诱导处理新鲜的红豆杉侧根2－9天后，再提取紫杉醇纯品。本发明为紫杉醇药物来源提供了新的途径，还解决了目前红豆杉人工栽培存在的生根率低、根剪切后存活率低、根增殖速度慢等缺点。

主权项

1.一种利用红豆杉侧根增殖生产紫杉醇的方法，其步骤包括：(1)在春夏季，选择1-2年生的中上部、向阳生长的红豆杉枝条做插穗材料； (2)将插穗基部依次插入浓度为0.01-0.2％高锰酸钾溶液、0.5-10％蔗糖溶液和10-500mg/L植物生长激素中分别浸泡2-30h，再扦插于已消毒的基质中，间歇喷洒霍格兰氏营养液培养；所述植物生长激素为α-萘乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸丁酯、吲哚丁酸的钠盐或钾盐中的一种或α-萘乙酸与吲哚丁酸的钠盐或钾盐的任意比例的组合；(3)待插穗生根后，拔出插穗，浸泡于浓度为10-1000mg/L激素溶液中20-120min，然后扦插于原来的扦插基质中，间歇喷洒霍格兰氏营养液培养；所述激素为α-萘乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸丁酯、吲哚丁酸中的一种或吲哚丁酸、α-萘乙酸按质量比为0.5∶1～1∶2的组合；(4)待根旺盛生长时，收获红豆杉小植株，在不伤及主根的条件下剪切侧根，第一级侧根保留至少2/3；剪切后植株的根部用浓度为50-1000mg/L的上述同种类激素溶液浸泡20-120min，然后扦插于原来的扦插基质中，间歇弥雾培养；(5)对经过前述扦插栽培后剪切得到的红豆杉侧根采用常规方法在≤55℃条件下干燥，然后经过粉碎、有机溶剂提取浓缩、柱层析、结晶、干燥处理后得到紫杉醇纯品。