[发明专利]自体大肠癌疫苗的制备方法无效
申请号: | 200710139687.7 | 申请日: | 2007-11-01 |
公开(公告)号: | CN101168053A | 公开(公告)日: | 2008-04-30 |
发明(设计)人: | 冯毅 | 申请(专利权)人: | 史增祥 |
主分类号: | A61K39/00 | 分类号: | A61K39/00;A61K35/38;A61P35/00 |
代理公司: | 山西太原科卫专利事务所 | 代理人: | 朱源 |
地址: | 034000*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | 本发明涉及一种肿瘤疫苗,具体为一种自体大肠癌疫苗的制备方法。解决了现有技术中利用患者自身DC和大肠肿瘤抗原制备自体抗肿瘤疫苗存在的杀伤效果不理想的问题。包括以下步骤,DC体外诱导培养,获得成熟的DC;取自体大肠癌细胞,得到肿瘤抗原备用;用制备好的肿瘤抗原和制备好的DC混合培养24h,以获得自体大肠癌抗原修饰的DC,再将DC和淋巴细胞按照1∶10~1000的数量比例混合培养。最后获得的自体大肠癌疫苗对大肠癌细胞杀伤率显著提高。 | ||
搜索关键词: | 肠癌 疫苗 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种自体大肠癌疫苗的制备方法,其特征在于:包括以下步骤,(1)、DC体外诱导培养,取外周静脉血,经梯度密度离心获得单核细胞加GM-CSF100ng/mL,IL-4 10ng/mL,培养5d,再加TNF-α50ng/mL,LPS100ng/mL培养2d,获得成熟的DC,(2)、肿瘤抗原的制备,取自体大肠癌细胞,培养后用0.25%胰蛋白酶消化收集,在-80℃和37℃条件下反复冻融4次,得到肿瘤抗原备用,(3)、用制备好的肿瘤抗原在37℃,5%CO2饱和湿度条件下与制备好的DC混合培养24h,以获得自体大肠癌抗原修饰的DC,(4)、再将DC和淋巴细胞按照1∶10~1000的数量比例混合在37℃,5%CO2 饱和湿度条件下共同培养24~72h。
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