[发明专利]一种呕吐毒素半定量速测试剂条的制备与使用方法

摘要

一种呕吐毒素半定量速测试剂条的制备与使用方法，属于生物技术领域。本发明涉及应用可特异性识别呕吐毒素的抗体来制备一种呕吐毒素半定量速测试剂条及其使用。其目的是为实现我国粮谷食品中呕吐毒素的快速检测开辟了广泛的应用前景。这种新型免疫速测产品的研制，不仅帮助解决因毒素标准品来源困难而影响检测这一难题，从而降低了检测成本；更为检测人员提供了安全检测的条件，具有简便、快速、灵敏度高、特异性好，安全、环保等优点。

主权项

1.一种呕吐毒素半定量速测试剂条的制备方法，其特征如下：速测试剂条由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和样品吸收垫四部分组成；样品垫和样品吸收垫为：吸水纸；金标垫为：用胶体金和呕吐毒素抗体结合制成金标抗体，结合过程为：将50mL浓度为1×10-4g/mL的氯金酸溶液加热到沸腾，然后迅速加入1.5mL柠檬酸三钠，继续加热搅拌反应15分钟得到胶体金溶液，然后将抗体溶液以1∶1体积比的比例逐滴加入到胶体金溶液中，边加边搅拌，反应5分钟后，即得到金标抗体溶液，将制备好的金标抗体调成A540＝1.0的浓度，分散在玻璃纤维滤膜上，自然干燥后即为金标垫备用；所用硝酸纤维素膜为：用自动点样仪对硝酸纤维素膜进行检测试剂线性包被，下端横线包被呕吐毒素抗原DON-O-BSA，浓度为1mg/mL为检测线，上端横线包被羊抗鼠IgG，浓度为2mg/mL为控制线，包被检测线和控制线后的硝酸纤维素膜自然干燥后用0.1mol/L的BSA的pH7.4的PBS溶液浸泡30min进行封闭处理，干燥后备用；将样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和样品吸收垫四部分依次相互叠加粘贴于试剂板上，以宽3.5mm/条切条后即为呕吐毒素半定量速测试剂条。