[发明专利]一种乙酸萘酯酶的提取方法有效
申请号: | 200710071204.4 | 申请日: | 2007-09-06 |
公开(公告)号: | CN101148660A | 公开(公告)日: | 2008-03-26 |
发明(设计)人: | 张安平;严航贞;叶璟;刘维屏;赵美蓉;张宏华;苗优娜 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N9/16 | 分类号: | C12N9/16 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 | 代理人: | 黄美娟;袁木棋 |
地址: | 310014*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供了一种乙酸萘酯酶的提取方法,所述方法包括如下顺序步骤:(1)将植物种子去皮磨粉,0~4℃下、用蒸馏水浸泡12~18h,取上清液离心,取上清液,得酯酶粗提液;(2)冰浴条件下,往酯酶粗提液中加入硫酸铵,使酶液中硫酸铵饱和度为50~75%,再于离心,取沉淀,用pH6~7的磷酸缓冲液稀释2~10倍,得稀释后的酶液;(3)将稀释后的酶液用蒸馏水透析,直至不产生沉淀为止,酶液再经浓缩、干燥,得所述乙酸萘酯酶。本发明所提供的乙酸萘酯酶提取方法,其原料来源广泛,制备工艺简单稳定,生产成本低,提取酶后的副产物无毒无害,可作其它原料用。经测定,产品用于对有机磷农药残留的检测,具有很高的灵敏度。 | ||
搜索关键词: | 一种 乙酸 萘酯酶 提取 方法 | ||
【主权项】:
1.一种乙酸萘酯酶的提取方法,所述方法包括如下顺序步骤:(1)将含有乙酸萘酯酶的植物种子去皮磨粉,0~4℃下、用8~15倍质量的蒸馏水浸泡12~18h,取上清液2000~6000r.p.m、0~4℃离心,取上清液,得酯酶粗提液;所述含有乙酸萘酯酶的植物种子来自下列之一的作物:①小麦、②荞麦、③黄豆、④玉米、⑤水稻、⑥大麦;(2)冰浴条件下,往酯酶粗提液中加入硫酸铵,使酶液中硫酸铵饱和度为50~75%,再于3000~5000r.p.m、0~4℃离心,取沉淀,用pH6~7的磷酸缓冲液稀释2~10倍,得稀释后的酶液;(3)将稀释后的酶液用10~30倍体积的蒸馏水透析,直至不产生沉淀为止,酶液再经浓缩、干燥,得所述乙酸萘酯酶。
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