[发明专利]海洋双RNA病毒MABV重组蛋白的制备方法与应用无效
| 申请号： | 200710066904.4 | 申请日： | 2007-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN101016547A | 公开（公告）日： | 2007-08-15 |
| 发明（设计）人： | 张传溪;徐海君;杨章女;林建国 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/33 | 分类号： | C12N15/33;C12N1/21;C07K19/00;C07K1/14;C07K14/08;A61K39/12;C07K16/18;G01N33/53;G01N33/569 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310029浙江省杭州市凯旋*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种含有海洋双RNA病毒MABV结构蛋白基因的重组蛋白制备方法和应用，所述的重组蛋白包括VP2融合蛋白或VP3融合蛋白以及VP2或VP3蛋白，其中VP2融合蛋白编码序列具有序列表中SEQID NO.1所述的核苷酸序列，VP3融合蛋白编码序列具有序列表中SEQID NO.2所述的核苷酸序列。本发明用重组蛋白制备的多克隆抗体在检测海洋双RNA病毒MABV中增加了检测的可信度；利用ELISA和westernblot进行检测，比其它方法(RT－PCR、原位杂交等)简单易行。利用制备VP2和VP3重组蛋白作为疫苗，比减毒疫苗更经济更安全。 | ||
| 搜索关键词： | 海洋 rna 病毒 mabv 重组 蛋白 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1、一种含有海洋双RNA病毒MABV基因的GST/VP2融合蛋白的生产方法，其特征在于：提取病毒MABV的RNA，反转录成cDNA，以cDNA为模板，设计引物：VP2正向引物(5’-ggatccatgtccctcaccacg-3’)VP2反向引物(5’-ctcgagttaggccaccagggtg-3’)经PCR扩增后，得到的DNA片段克隆入pGEM-T-easy载体后用BamH I和Xho I双酶切，克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-4t-2中，并转化到表达菌株BL21进行诱导表达，表达条件为细菌OD600＝1.0，IPTG终浓度为0.8mM，37℃，摇6h，采用包涵体分离结合割胶回收的方法纯化得到GST/VP2融合蛋白。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江大学，未经浙江大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/200710066904.4/，转载请声明来源钻瓜专利网。
