[发明专利]一种奶牛再克隆的方法无效
| 申请号： | 200710064767.0 | 申请日： | 2007-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN101050458A | 公开（公告）日： | 2007-10-10 |
| 发明（设计）人： | 张家新;王海;张向利;赵孟彬;张红霞;郭丽丽;安晶;王月;郭敏 | 申请（专利权）人： | 北京锦绣大地农业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/06 | 分类号： | C12N15/06;A61D19/04 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 | 代理人： | 张涛 |
| 地址： | 100049北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及“一种奶牛的再克隆方法”包括供体细胞和受体卵母细胞培养，核移植、融合与激活，重构胚的培养和重构胚移植，其特征在于：所述受体细胞的培养液中添加有：M199+10％FCS+10μg/ml FSH+1μg/ml LH+1μg/ml Estradiol+0.0625g Penicillium+0.05gStreptomycin+0.57mmol/ml Cysteine+1mmol/ml L－Glutamine+10ng/ml EGF(Epidermal GrowthFactor)；供体细胞的培养液中添加有1L DMEM(干粉)+2.75g NaHCO3+10％ FCS+1mmol/L Na－Pyruvate+1mmol/ml L－Glutamine+0.0625g Penicillium+0.05gStreptomycin+0.1mmol/L β－Mercaptoethanol+10ng/ml EGF。本发明方法使克隆效果再次放大，是提高克隆效率的有效方法之一。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 奶牛 克隆 方法 | ||
【主权项】：
1.一种奶牛的再克隆方法，包括供体细胞培养、受体卵母细胞培养，核移植、融合与激活，重构胚的培养和重构胚移植，其特征在于：所述受体卵母细胞的培养液中添加有：M199+10％FCS+10μg/ml FSH+1μg/ml LH+1μg/ml Estradiol+0.0625g Penicillium+0.05gStreptomycin+0.57mmol/ml Cysteine+1mmol/ml L-Glutamine+10ng/ml EGF；供体细胞的培养液中添加有1LDMEM干粉+2.75g NaHCO3+10％FCS+1mmol/L Na-Pyruvate+1mmol/mlL-Glutamine+0.0625g Penicillium+0.05g Streptomycin+0.1mmol/L β-Mercaptoethanol+10ng/ml EGF。
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