[发明专利]一种苯系物厌氧降解菌群的驯化筛选方法及应用

摘要

本发明公开了属于受污染土壤与水的生物降解处理技术领域的一种苯系物厌氧降解菌群的驯化筛选方法及应用。在污染的土壤中按质量比加入电子受体、硫化钠和BTEX混合物，密封静置3个月后在充满氮气的厌氧箱内按比例加入基础培养基、微量金属液和维生素c溶液的混合液，进行土壤驯化，在充满氮气的厌氧箱内按水、土的质量比向厌氧瓶内接入驯化的土壤，并且按质量比加入BTEX、加入电子受体、加入硫化钠。在温度为20±2℃、在旋转的振荡器中培养7～9天后，循环9次以上，即可得到去除BTEX的降解菌群。本方法能够驯化筛选到厌氧降解性能好的微生物菌群，对BTEX的降解速率范围为1.6～3.5mg·L^－1·d^－1。

主权项

1.一种苯系物厌氧降解菌群的驯化筛选方法，其特征在于，该方法的具体步骤如下：(1)选用受石油污染的土壤，按质量比为1～1.5∶1的比例加入去离子水，按质量比为150～200∶1的比例加入硫化钠，按质量比为2000～2500∶1的比例加入BTEX混合物，按质量比为100～150∶1的比例加入电子受体，混合均匀后密封静置时间大于3个月；(2)在充满氮气的厌氧箱内向体积为50～200mL的厌氧瓶中按800∶5∶1的比例加入基础培养基、微量金属液和维生素c溶液，其中基础培养基的组成为：NH4Cl：1.0g·L-1，KH2PO4：1.0g·L-1，MgCl2：0.1g·L-1，CaCl2·2H2O：0.05g·L-1；微量金属液的组成为：CoCl2·6H2O：30mg·L-1，CuCl2：0.15mg·L-1，H3BO3：5.7mg·L-1，MnCl2·4H2O：20mg·L-1，Na2MoO4·2H2O：2.5mg·L-1，NiCl2·2H2O：1.5mg·L-1，ZnCl2：2.1mg·L-1；(3)在充满氮气的厌氧箱内按水土质量比为200～250∶1的比例向厌氧瓶内接入步骤(1)驯化的土壤，按体积比7500～8000∶1的比例加入BTEX，按质量比为25～30∶1的比例加入电子受体，按质量比为200～250∶1的比例加入硫化钠；(4)将厌氧瓶在温度为20±2℃、转速为100r/min的振荡器中培养7～9天后，按接种体积比为200～250∶1的比例转入另一厌氧瓶内，当转接次数大于9之后即可获得去除BTEX的降解菌群。