[发明专利]一种筛选甘薯耐盐突变体的方法

摘要

本发明公开了一种筛选甘薯耐盐突变体的方法。该方法包括：1)将继代培养的甘薯胚性悬浮细胞，进行70－100Gy的⁶⁰Coγ－射线辐照处理，剂量率为1－1.2Gy/分钟；2)将处理后的胚性悬浮细胞用液体MS+1.5～2.5mg/L 2，4－D+2.0～3.5％NaCl培养3－5周，转至液体MS+1.5～2.5mg/L 2，4－D+1.0～2.0％NaCl中培养1－3周，再转至液体MS+1.5～2.5mg/L 2，4－D中培养；3)将获得的细胞团转移到固体MS+1.5～2.5mg/L 2，4－D中培养；4)将具有体细胞胚的胚性愈伤组织在固体MS+0.5～2.0mg/L ABA+2.0～3.5％NaCl上培养3－5周，转至固体MS+0.5～2.0mg/L ABA+1.0～2.0％NaCl上培养1－3周，再转至固体MS+0.5～2.0mg/L ABA上培养；5)将再生的小植株培养在MS基本培养基上，使其形成完整的再生植株；6)将再生植株培养在MS+1.0％～2.0％NaCl上；7)将成活的植株用含有0.5～1.0％NaCl的霍格兰溶液水培3－5周，得到甘薯耐盐突变体。

主权项

1、一种筛选甘薯耐盐突变体的方法，其特征是：它包括以下步骤：(1)将继代培养的甘薯胚性悬浮细胞，用辐射剂量为70-100 Gy的60Coγ-射线进行辐照处理，剂量率为1-1.2Gy/分钟；(2)将辐照处理后的甘薯胚性悬浮细胞用含有1.5-2.5mg/L 2，4-D、质量百分含量为2.0％-3.5％的NaCl的MS液体培养基培养3-5周后，转至含有1.5-2.5mg/L2，4-D、质量百分含量为1.0％-2.0％的NaCl的MS液体培养基中培养1-3周后，再转至含有1.5-2.5mg/L 2，4-D的MS液体培养基中培养；(3)将获得的直径为0.5-2.0mm的细胞团转移到含有1.5-2.5mg/L 2，4-D的MS固体培养基中，在25-28℃、黑暗条件下进行静置培养，使细胞团增殖形成胚性愈伤组织和体细胞胚；(4)将具有体细胞胚的胚性愈伤组织在含有0.5-2.0mg/L ABA、质量百分含量为2.0％-3.5％的NaCl的MS固体培养基上培养3-5周后，转移至含有0.5-2.0mg/L ABA、质量百分含量为1.0％-2.0％的NaCl的MS固体培养基上培养1-3周后，再转至含有0.5-2.0mg/L ABA的MS固体培养基上培养，使体细胞胚发芽形成再生小植株；(5)将再生的小植株培养在MS基本培养基上，使其形成完整的再生植株；(6)将再生的完整植株培养在含有质量百分含量为1.0％-2.0％的NaCl的MS培养基上，筛选除去假阳性耐盐植株；(7)将获得的耐盐植株移栽到土壤中，使其成活；(8)将成活的植株进一步用含有质量百分含量为0.5％-1.0％的NaCl的霍格兰(Hoagland)溶液水培3-5周，再次筛选除去假阳性耐盐植株，得到甘薯耐盐突变体。