[发明专利]具有抗肿瘤活性的蜈蚣多糖蛋白复合物的制备方法及用途

摘要

本发明公开了一种具有抗肿瘤活性的蜈蚣多糖蛋白复合物的制备方法及用途。步骤是：①以少棘蜈蚣为原料母体，清洗，干燥；②研磨干燥后的原料母体得蜈蚣细粉；③将蜈蚣细粉经水提、过滤得残渣再重复水提，离心后取上清；④减压浓缩上清，经醇提后得沉淀；⑤将沉淀经硫酸铵分段盐析后收集60％饱和度的沉淀物；⑥将沉淀物经DEAE－50纤维素离子交换层析柱、洗脱、脱盐后浓缩；⑦将所得浓缩液经Sephadex G－200柱纯化，得蜈蚣多糖蛋白复合物纯品。制备方法易行，操作简便，原料来源广泛，且应用在制备抗肿瘤药物中能有效杀伤肿瘤细胞和提高机体免疫力，疗效显著。该多糖蛋白复合物在制备治疗或预防肿瘤的药物中的应用。

主权项

1.一种蜈蚣多糖蛋白复合物的制备方法，它包括下列步骤：A.以少棘蜈蚣作为原料母体，清洗3～5次，烘干2～4小时，烘干温度控制在60～80℃；B.研磨第A步骤中干燥后的原料母体并过50～200目筛得蜈蚣粉；C.将第B步骤中的蜈蚣粉用5倍体积蒸馏水抽提1～3小时，温度控制在80～90℃，纱布过滤得一份提取液，取残渣再用4倍体积蒸馏水重复提取三次得三份提取液，合并四份提取液，2500r/min离心20～30分钟，获取上清；D.将第C步骤中的上清减压浓缩，温度控制在50～70℃，加入5倍体积95％乙醇，于4℃静置过夜，倾去上清，取沉淀，2500r/min离心10分钟，收集沉淀；E.将第D步骤中的沉淀用500ml蒸馏水溶解，计量40％饱和度所需要的固体硫酸铵量，于4℃加入，搅拌4h、10000r/min离心20分钟后，收集上清并计量体积，重复此步骤的操作，收集60％饱和度的沉淀物；F.将第E步骤中的沉淀物用30ml蒸馏水溶解后，上DEAE-50离子交换层析柱纯化，以蒸馏水平衡，用0.05～0.25mol/L NaCl溶液洗脱，收集洗脱液，用透析袋在双蒸水中透析48小时脱盐，再用聚乙二醇20000浓缩；G.将第F步骤中的浓缩液上Sephadex G-200层析柱纯化，用0.02mol/L pH为7.2的Tris-HCl溶液洗脱后，经真空冷冻干燥，预冻温度控制在-45～-15℃，加热温度控制在20～40℃，干燥8～12小时后得蜈蚣多糖蛋白复合物。