[发明专利]乙酰胆碱酯酶的提取方法及应用无效
申请号: | 200710052773.4 | 申请日: | 2007-07-18 |
公开(公告)号: | CN101126082A | 公开(公告)日: | 2008-02-20 |
发明(设计)人: | 刘晓宇;吴谋成;徐盈;杨健 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N9/16 | 分类号: | C12N9/16;G01N33/573;C12Q1/46 |
代理公司: | 武汉开元专利代理有限责任公司 | 代理人: | 朱盛华 |
地址: | 430070湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 乙酰胆碱酯酶的提取方法及应用,涉及一种提取鲫鱼乙酰胆碱酯酶的方法及用其检测有机磷农药残留量的方法。提取法如下:鲫鱼的组织用磷酸缓冲溶液在冰浴条件下匀浆,冷冻离心,得酶液。检测方法是以鲫鱼脑乙酰胆碱酯酶为酶源,以2,6-二氯靛酚钠为显色剂,以定性滤纸为载体,以吸附法固定化酶。具体操作为:取过塑硬纸片,粘上小滤纸片,一边加显色剂和碘化硫代乙酰胆碱溶液,另一边加乙酰胆碱酯酶溶液,滤纸片放入冰箱中冷藏干燥,用时取出,有机磷农药洗脱液滴加至滤纸上,滤纸充分润湿,两片滤纸片叠合几分钟后观察变色,无有机磷农药存在时试纸由蓝色变为无色,反之蓝色不褪或褪色不明显,浓度越高越明显。本发明成本低、检测速度快、灵敏度高。 | ||
搜索关键词: | 乙酰 胆碱酯酶 提取 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.乙酰胆碱酯酶的提取方法,其特征在于分别取鲫鱼脑、肌肉和肝脏各组织,用pH7.5,0.1mol/L的磷酸缓冲溶液,在冰浴条件下匀浆,制成匀浆液,匀浆质量体积比为1∶4,在4℃下,以10000~12000r/min冷冻离心25~30min,得上清液,即为乙酰胆碱酯酶提取液,保存于冷藏室中。
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