[发明专利]基于梯状回收的基因拷贝数鉴定和各拷贝序列获得的方法

摘要

本发明公开了一种基于梯状回收的基因拷贝数鉴定和各拷贝序列获得的方法，克服了目前判断基因拷贝数所采用的Southern杂交、竞争性PCR、实时定量PCR均不能确定每个拷贝的核苷酸序列的缺陷。其技术方案是：基因组DNA充分酶切→酶切产物电泳→梯状回收→PCR扩增→判断基因拷贝数→PCR产物克隆测序→获得每个拷贝的核苷酸序列。本发明可成功的判断脱水素基因在无核白葡萄中的拷贝数，结果与Southern杂交结果相同，并且获得了不同拷贝脱水素基因的部分核苷酸序列。可用于判断内源和外源基因的拷贝数，是以较低的成本判断基因拷贝数以及获得每个拷贝的核苷酸序列。其原理及操作简单，成本低廉，具有广阔的开发应用前景。

主权项

1.基于梯状回收的基因拷贝数鉴定和各拷贝序列获得的方法，其特征是采取如下技术方案：基因组DNA充分酶切→酶切产物电泳→梯状回收→PCR扩增→判断基因拷贝数→PCR产物克隆测序→获得每个拷贝的核苷酸序列。