[发明专利]喹噁啉-2-羧酸残留的酶联免疫检测方法及试剂盒无效
申请号: | 200610164837.5 | 申请日: | 2006-12-06 |
公开(公告)号: | CN1971279A | 公开(公告)日: | 2007-05-30 |
发明(设计)人: | 袁宗辉;张泽英;彭大鹏;王玉莲;谢长清;陶燕飞;陈冬梅;黄玲利;戴梦红;刘振利 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | G01N33/544 | 分类号: | G01N33/544;G01N21/78 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人: | 张红兵 |
地址: | 430070湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明属于免疫化学分析技术领域。公开了一种用于喹噁啉-2-羧酸残留检测的酶联免疫方法及试剂盒,本发明的方法主要包括药物改造,免疫原、包被原、抗体的制备以及样品前处理和ELISA检测方法的建立。本发明的试剂盒主要由喹噁啉-2-羧酸(QCA)特异性抗体、QCA标准品、包被有QCA与γ-氨基丁酸反应后与卵清蛋白偶联物的酶标板组成。检测时,样品经偏磷酸水解处理,释放QCA,MAX柱净化,丁胺衍生处理,采用间接竞争ELISA方法测定。本发明的方法及试剂盒具有简便、快速、灵敏、准确等优点,能同时快速检测大批样品,组织最低检测限为0.6μg/kg。 | ||
搜索关键词: | 喹噁啉 羧酸 残留 免疫 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
1、一种喹噁啉-2-羧酸残留检测酶联免疫方法,包括药物改造、免疫原与包被原的制备、抗体的制备和样品前处理,其特征在于按照以下步骤:(1)将喹噁啉-2-羧酸(QCA)与γ-氨基丁酸(ABA)反应得到产物QCA-ABA;(2)将步骤(1)所述的产物QCA-ABA与卵清蛋白相偶联得到包被原;(3)将将步骤(1)所述的产物与牛血清白蛋白相偶联得到免疫原;(4)用步骤(3)的免疫原免疫兔得到特异性兔多克隆抗体;(5)用步骤(2)的包被原包被固相载体;(6)将所述的样品先经酸解提取后再过MAX柱净化,最后加入衍生试剂和催化剂进行处理,得到待测产物;(7)将步骤(6)的待测产物进行酶联免疫检测。
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