[发明专利]一种奶牛性控精子冷冻保存精液稀释液

摘要

本发明属于奶牛繁殖技术领域，具体涉及奶牛性控精子冷冻保存精液稀释液。本发明的要点是将所述的精液稀释液分别制备成A、B、C、D液，然后按照适当的比例混合，在所述的C液(稀释液1)和D液(稀释液2)中分别加入了5％～20％猪精清，既明显提高了奶牛性控精液的精子顶体完整率和精子的活率，又有助于降低精液的密度，从而节约了精液制备成本。经检测，本发明的奶牛性控精子冷冻保存精液稀释液的精子活率分别达到50.88－62.88％，平均数为57.41％，比对照组平均提高了15.13个百分点；精子顶体完整率分别达到50.80－53.20％，平均数为51.90％，比对照组平均提高了7.0个百分点。

主权项

1、一种奶牛性控精子冷冻保存精液稀释液，其特征在于，按重量/体积计的配比为：(1)制备A液：将20～26g/L三羟甲基氨基甲烷，10～15g/L柠檬酸，9～13g/L葡萄糖混合，加蒸馏水稀释至1L，得到所述的A液；(2)制备B液：先将20％的新鲜卵黄和80％的A液均匀混合，再加入500-1000IU/mL青霉素和500-1000IU/mL链霉素，均匀混合，得到所述的B液；(3)制备C液：将80％～95％的B液和5％～20％猪精清均匀混合，得到所述的C液；(4)制备D液：先将66％～81％的B液和5％～20％猪精清均匀混合，再与14％的甘油均匀混合，得到所述的D液；(5)将步骤(3)的C液稀释奶牛性控精液至离心前总体积的一半，4℃平衡1.5h，得到混合液1；(6)将D液加入到步骤(5)的混合液1中至离心前总体积的3/4，4℃平衡15min，得到混合液2，再将D液加入混合液2中至离心前总体积的4/4，得到混合液3；(7)将步骤(6)的混合液3在3000rpm下离心浓缩15min，去上清，根据浓缩精液的密度，添加等量体积的C液和D液，使奶牛性控精子密度为800-1000万/毫升左右，得到奶牛性控精子冷冻保存精液稀释液。