[发明专利]用金磁微粒对体液中生物分子进行免疫学检测的方法

摘要

一种用金磁微粒对体液中生物分子进行免疫学检测的方法，其以金磁微粒作为反应和分离的固相载体，将抗体或抗原偶联在金磁微粒的表面，使包被于磁微粒表面的抗体或抗原与血清中特异性抗原或抗体结合，形成抗原－抗体复合物，再将金磁微粒表面的抗原－抗体复合物与标记物标记的特异性抗原或抗体结合，通过相应的检测系统，即可对待测生物分子进行定性或定量检测。本发明以金磁微粒替代酶标板作为固相载体，解决了背景技术中固定容量较小、灵敏度相对较低、偶联的生物分子的活性易受损的技术问题，具有无污染、检测速度快、特异性高、重复性好等特点，将纳米、微米级金磁微粒合成技术与磁分离技术相结合，大大提高了传统酶联免疫反应的敏感性和方便性。

主权项

1.一种用金磁微粒对体液中生物分子进行免疫学检测的方法，其特征在于，它的实现步骤包括：(1)固定：以金磁微粒为反应和分离的固相载体，将抗原或抗体偶联在金磁微粒的表面；所述将抗原或抗体偶联在金磁微粒表面的方法包括：(1.1)预处理：取金磁微粒，用偶联缓冲液清洗1～3次；(1.2)偶联：将需要偶联的抗原或抗体溶解于偶联缓冲液中，混匀，加入到经预处理的金磁微粒中，置于摇床中，在20～40℃，170～190rpm条件下充分反应；反应完毕，磁性分离，弃上清；(1.3)平衡：用平衡缓冲液清洗1～2次，磁性分离，弃上清；(2)封闭：用封闭液，在20～40℃，170～190rpm条件下，在摇床中封闭反应1～2小时，封闭金磁微粒表面未与抗原或抗体偶联的空余位；磁性分离，弃上清；用清洗缓冲液清洗2～4次，于保存缓冲液中保存备用；(3)与待测物结合：使包被在金磁微粒表面的抗原或抗体与体液中特异性的抗原或抗体结合，形成特异性抗原-抗体复合物；(4)磁性分离：通过外加磁场将分离出特异性抗原-抗体复合物；(5)与标记物结合：将金磁微粒表面的特异性抗原-抗体复合物与带标记物的特异性抗原或抗体相结合；(6)检测：根据待测物及标记物用相应的检测方式检测。