[发明专利]Q型人对氧磷酶1基因表达载体的构建及其应用无效

专利信息
申请号: 200610097968.6 申请日: 2006-11-24
公开(公告)号: CN1962874A 公开(公告)日: 2007-05-16
发明(设计)人: 秦浚川;张驰;朱洁;臧宇辉;彭薇;姜晓玲 申请(专利权)人: 南京大学
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C12N15/52;A61K31/7088;A61P1/16
代理公司: 南京知识律师事务所 代理人: 高桂珍
地址: 210093*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明属于生物技术制药技术领域。本发明应用重组的Q型对氧磷酶基因1(hPON1Q)表达质粒经骨骼肌电刺激转移异位分泌表达,有效地提高血清PON1水平,防治肝脏的损伤,从而作为新型基因药物而保护肝脏。构建hPON1Q在哺乳动物细胞中表达的重组质粒pcDNA3.0-hPON1Q,运用电刺激介导的方法使之在小鼠骨骼肌组织中高效表达并大量分泌,血清对氧磷酶活力在转基因10天后上升到正常小鼠的1.5倍并可维持到第16天以上。转基因组和正常小鼠(阳性对照组)分别腹腔注射四氯化碳建立小鼠急性肝损伤模型24小时后,转基因组小鼠血清ALT和AST水平显著低于阳性对照组(P<0.01),病理学分析显示转基因组小鼠各项肝细胞损伤指标均显著低于阳性对照组(P<0.01)。以上结果表明重组人PON1Q质粒可作为基因药物提高血清PON1活性,用于肝脏损伤的预防和治疗。
搜索关键词: 氧磷酶 基因 表达 载体 构建 及其 应用
【主权项】:
1.一种用于在哺乳动物细胞内表达Q型人对氧磷酶1hPON1Q的重组质粒,其特征是将PCR扩增后的hPON1Q基因克隆于pcDNA3.0载体的EcoRI和HindIII位点之间,使hPON1Q基因位于CMV启动子的控制之下。
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