[发明专利]一种从感病昆虫血淋巴中分离纯化昆虫病原真菌菌体的方法无效
| 申请号： | 200610054049.0 | 申请日： | 2006-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN1807580B | 公开（公告）日： | 2010-05-12 |
| 发明（设计）人： | 夏玉先;张沧桑;王中康;殷幼平;彭国雄 | 申请（专利权）人： | 重庆大学;重庆重大生物技术发展有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12S3/22;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 重庆弘旭专利代理有限责任公司 50209 | 代理人： | 周韶红 |
| 地址： | 400030 *** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从感病昆虫血淋巴中分离纯化昆虫病原真菌菌体的方法。它是采用一系列酶处理感病昆虫的血细胞，以破坏和除去昆虫的遗传物质，并加以分离纯化制得。将获得的病原真菌菌体用来提取DNA和mRNA，经PCR和RT-PCR的验证，无昆虫遗传物质的污染，可用于构建基因文库，也为进一步揭开虫生真菌侵染机制打下坚实基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 昆虫 淋巴 分离 纯化 病原 真菌 菌体 方法 | ||
【主权项】：
一种从感病昆虫血淋巴中分离纯化昆虫病原真菌菌体的方法，其特征在于：将感病昆虫的血细胞采用蛋白酶K处理进行裂解及其DNA和RNA采用酶处理进行降解，再加以分离沉淀，纯化制得病原真菌菌体；在整个酶解过程中，采用聚合酶链式反应(以下称PCR)检测保守序列监控，最后采用PCR和逆转录-聚合酶链式反应(以下称RT-PCR)检测保守序列方法对昆虫病原真菌菌体进行鉴定。
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