[发明专利]日本血吸虫压电质量免疫传感器的制备及应用

摘要

一种日本血吸虫压电质量免疫传感器，采用直接固定抗原法，将血吸虫优势诊断抗原分子31/32kDa共价结合于石英晶体表面，使用后的石英晶体置四氢呋喃(THF)中浸泡，THF能将抗原抗体复合物解离并从传感表面清洗下来，做到了不损害固相抗原的活性。我们观察了不同抗原浓度、检测时间及其频移值的变化，并对样品进行重复检测比较。集生物学、物理学、化学及医学为一体的压电质量免疫传感器装置简单，易于操作，对阳性血清样品不仅具有较高的识别能力，还能定量测定血清样本中的抗体水平，为一种理想的血吸虫病临床诊断仪器。

主权项

1、一种压电质量免疫传感器的制备方法，其特征在于制备步骤为：(1)抗原制备：日本血吸虫感染家兔后45天剖杀动物，灌注法收集成虫，冻干后置缓冲液中匀浆，4℃下14500rpm离心30min，以ACA54凝胶柱层析分离纯化得日本血吸虫成虫31/32kDa抗原，(2)晶体表面预处理：先将压电石英晶振在四氢呋喃(THF)中浸泡，于空气中晾干后在含有甲基丙烯酸羟乙酯(HJEMA)和甲基丙烯酸甲酯(MMA)共聚物的四氢呋喃溶液中浸渍，这样在晶体表面涂覆上一层均匀的聚合物薄膜，(3)抗原包被：于空气中晾干后的石英晶体经CNBr活化处理后，置于抗原包被液中，37℃恒温1h，以PBS洗涤3次，蒸馏水洗涤3次，吹干。最后置于pH2.4、0.1mol/L甘氨酸溶液中，37℃温育40min，洗涤方法同上，吹干。