[发明专利]改进的2－脱氧－D－核糖－5－磷酸醛缩酶及其用于生产2,4,6－三脱氧己糖或其6－卤代或6－氰基取代的衍生物的用途

摘要

本发明涉及下述酶的经过分离的突变体，所述酶来自2－脱氧－D－核糖－5－磷酸醛缩酶野生型酶的组，所述突变体的生产率因子(通过特定检验测定)比突变体来源的相应野生型酶的生产率因子高至少10％。突变体在对应于Escherichia coli K12(EC 4.1.2.4)野生型酶序列中K13、T19、Y49、N80、D84、A93、E127、A128、K146、K160、I166、A174、M185、K196、F200和S239位点中的一处或多处具有至少一种氨基酸取代，和/或在对应于其中S258和Y259的位点有至少一处氨基酸缺失，可选地，与特定C－末端延伸和/或N－末端延伸组合。本发明还涉及筛选方法，用于找到下述2－脱氧－D－核糖－5－磷酸醛缩酶(原样或作为突变体)，所述酶具有比对照值高至少10％的生产率因子(由所述特定检验测定，其形成筛选的重要部分)。此外，本发明涉及由所述筛选方法获得的突变体酶以及编码此类突变体的核酸，还涉及分别包含此类核酸或突变体的载体和宿主细胞。最后，本发明涉及此类(优选地，突变体)酶、核酸、载体和宿主细胞在生产，例如，6－氯－2，4，6－三脱氧－D－赤六吡喃糖苷中的用途。

主权项

1.酶的经过分离的突变体，所述酶来自2-脱氧-D-核糖-5-磷酸醛缩酶野生型酶的组，所述野生型酶来自属于由真核物种和原核物种构成的组的天然来源，此类野生型酶每种都具有特定的生产率因子，这是通过在由乙醛和氯乙醛的至少等摩尔混合物对6-氯-2，4，6-三脱氧-D-赤六吡喃糖苷(CTeHP)的生产过程中进行DERA生产率因子检验测定的，其中，所述经过分离的突变体具有比突变体来源的相应野生型酶的生产率因子高至少10％的生产率因子，并且其中，所述突变体和所述相应野生型酶两者的所述生产率因子都是在相同条件下测量的。