[发明专利]口蹄疫疫苗制备方法

摘要

本发明提供一种口蹄疫疫苗制备方法，包括细胞培养、病毒繁殖和疫苗制备工艺。单层细胞长满后接入种毒和病毒培养液，其中种毒使用量按病毒培养液的1～5％，病毒培养液主要包括：水解乳蛋白溶液85～90％，抗生素0.5～2％，氨基酸溶液5～10％， 3％的谷氨酰胺溶液1％，加HEPES0.5～0.8％，加碱溶液调pH至7.5±0.1；灭活病毒后混合制备疫苗，其中二价苗抗原比例为1∶1～3，三价苗抗原比例为1∶1～3∶1～3；双相佐剂型疫苗，佐剂为法国SEPPIC的ISA206，佐剂与混合抗原的比例为1∶1；单相佐剂型疫苗，佐剂为法国SEPPIC的50V，佐剂与混合抗原的配比为1∶1。本发明便于超大规模生产，适于制备多价疫苗，不限制毒株使用，缩小剂量，同时确保免疫效力。

主权项

1.一种口蹄疫疫苗制备方法，包括细胞培养、病毒繁殖和疫苗制备工艺，其特征在于：单层细胞长满后接入种毒和病毒培养液，其中以体积计种毒接入量为病毒培养液的1～5％；病毒培养液主要包括：水解乳蛋白溶液85～90％，抗生素0.5～2％，氨基酸溶液5～10％，3％的谷氨酰胺溶液1％，加HEPES0.5～0.8％，加碱溶液调pH至7.5±0.1；转瓶中病毒培养液加入量为200-400ml/15立升瓶，出现细胞致病作用后，收获病毒液，置-20℃保存。测定病毒LD50＞107.5LD50/0.2ml，病毒TCID50＞108.5TCID50/0.2ml，融化后采用振动膜除细胞碎片机除去细胞碎片，BEI灭活病毒；将培养的各型合格病毒液混合制备疫苗。