[发明专利]一种改装钝顶螺旋藻整藻胆体的方法无效
| 申请号： | 200510042027.8 | 申请日： | 2005-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN1654628A | 公开（公告）日： | 2005-08-17 |
| 发明（设计）人： | 张玉忠;张熙颖;陈秀兰;周百成 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N1/12 | 分类号： | C12N1/12 |
| 代理公司： | 济南金海诺知识产权代理有限公司 | 代理人： | 于冠军 |
| 地址： | 250100山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 一种改装钝顶螺旋藻整藻胆体的方法，属于海洋生物技术领域。本发明以可以大规模培养的蓝藻钝顶螺旋藻为材料，首先应用超声波破碎细胞、去污剂TritonX－100从类囊体膜上解离藻胆体、常规离心去除TritonX－100、叶绿素和细胞碎片得到钝顶螺旋藻藻胆体，然后应用戊二醛交联技术，用RPE改装钝顶螺旋藻藻胆体，最后经聚乙二醇沉淀和SepharoseCL－4B柱层析得到纯的用RPE改装的钝顶螺旋藻藻胆体。改装后的藻胆体，可以大幅度的提高检测的质量和检测灵敏度，在超灵敏的生物医学检测中具有很好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 改装 螺旋藻 整藻胆体 方法 | ||
【主权项】：
1、一种改装钝顶螺旋藻完整藻胆体的方法，步骤如下：(1)以新鲜的蓝藻-钝顶螺旋藻为原料，溶于磷酸氢二钾-磷酸二氢钾溶液中，采用超声波破碎细胞；(2)在破碎的藻体中加入去污剂，将藻胆体从类囊体膜上解离下来，离心，去除去污剂和破碎的细胞，制备藻胆体的粗提物；(3)采用戊二醛交联技术，用R-藻红蛋白改装钝顶螺旋藻藻胆体，具体如下：取步骤(2)的藻胆体的粗提物用0.9mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液配制成溶液，取钝顶螺旋藻藻胆体溶液0.3mL～0.4mL，迅速与0.07mL～0.09mL R-藻红蛋白溶液混合，R-藻红蛋白溶液用0.1mol/L磷酸缓冲液配制，pH6.8；将混合液边振荡边缓慢滴加用0.75mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液配制的0.1％(W/V)戊二醛溶液0.02mL～0.04mL，19～22℃反应2小时～2.5小时，加1mol/L的甘氨酸溶液0.04mL～0.06mL终止反应30分钟～40分钟，即得改装的钝顶螺旋藻藻胆体。
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