[发明专利]欧文氏菌发酵生产门冬酰胺酶方法

摘要

本发明是一种欧文氏菌(Erwinia carotovora)发酵生产门冬酰胺酶方法。它采用生物技术从土壤分离、纯化培养、诱变育种中获取欧文氏菌菌株。利用这些菌株，经选定的发酵培养基配方及工艺条件，能高效产出门冬酰胺酶。本发明具有如下优点：可进行大规模生产，因此成本较低；能高效表达门冬酰胺酶，发酵效价≥40IU/ml，最高可达120IU/ml。

主权项

1、一种欧文氏菌(Erwinia carotovora)发酵生产门冬酰胺酶方法，其特征在于：A.发酵培养基配方，按重量百分比为：玉米浆 0.5～10％酵母膏 0.1～10％谷胺酸 0.1～10％K2HPO4 0.01～0.5％Na2SO4 0.01～0.5％固体培养基时，上配方中须加入琼脂1.0～2.0％；B.发酵工艺条件(1)摇瓶培养试管菌种接入摇瓶中，每瓶接入菌种2环，培养温度32～42℃，摇床转速100～300rpm，培养时间5～48h，PH值5.0～9.0；(2)种子罐培养接种量0.1～20％，培养温度32～42℃，搅拌速度80～500rpm，罐压0.02～0.14Mpa，通风量1∶0.1～1∶2(V/V/min)，培养时间5～48h，PH值5.0～9.0；(3)发酵罐培养接种量1～30％，发酵温度32～42℃，搅拌速度80～450rpm，罐压0.015～0.14Mpa，通风量1∶0.1～1∶2(V/V/min)，培养时间5～48h，发酵液PH值5.0～9.0。