[发明专利]一种束丝藻毒素的提取方法

摘要

本发明公开了一种束丝藻毒素的提取方法，首先是材料的采集，采集水华束丝藻，冷冻干燥；其次是称取冷冻干燥的束丝藻藻粉，加入乙酸，破碎，在室温下磁力搅拌提取，离心，收集上清；第三是粗提物的纯化，将粗提物过固相萃取柱，用酸化甲醇洗脱，并将洗脱液浓缩；第四是将浓缩样品用乙酸溶液溶解，调pH值，低温保存。本发明方法易行，操作简便，安全可靠，可广泛地用于对有毒束丝藻水华的监测和预警工作。

主权项

1.、一种束丝藻毒素的提取方法，包括下列步骤：A.材料的采集与处理：用孔径为60-70μm滤网收集培养或于自然水华中采集束丝藻，-70--100℃冷冻干燥；B.提取步骤：称取0.3-1.0克冷冻干燥的束丝藻藻粉，加入15-25毫升0.01-0.1M乙酸溶液，先用超声波破碎10-15分钟，然后于20-25℃磁力搅拌提取25-40分钟，0-4℃，6000-10000r/min离心10-15分钟，收集上清，并将离心残渣用10-15毫升乙酸溶液提取液重复提取一次，合并上清液，得毒素粗提物；C.提取液浓缩：用旋转蒸发仪将样品浓缩，然后用2-3毫升双蒸水溶解提取浓缩物；D.提取液纯化：将步骤B所得提取物过预先用8-10毫升100％甲醇活化、8-10毫升双蒸水平衡的Sep-pak C18固相萃取柱；E.提取物洗脱：先用1-3毫升双蒸水预淋洗，再用8-15毫升酸化的甲醇进行洗脱，洗脱液用旋转蒸发仪浓缩；F.提取物保存：将最终浓缩的提取物用0.01-0.1M的乙酸溶液溶解，调pH值至2.0-4.0，-20--40℃保存备用。