[发明专利]鸡大肠杆菌异型外膜蛋白细胞工程菌株的制备方法无效
| 申请号： | 200310106662.9 | 申请日： | 2003-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN1528884A | 公开（公告）日： | 2004-09-15 |
| 发明（设计）人： | 丁伯良;鄢明华;王英珍;黄金海;李秀丽 | 申请（专利权）人： | 天津市畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N15/03;C12N15/31;C07K14/245;A61K39/108;//;C12R1:19) |
| 代理公司： | 天津市杰盈专利代理有限公司 | 代理人： | 王念冬 |
| 地址： | 300112天津市西*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 一种鸡大肠杆菌异型外膜蛋白细胞工程菌株的制备方法，首先将病料接种、培养，分离出的细菌冻存备用；二是选出优势血清型；三提取优势血清型菌株外膜蛋白，找出同一血清型的菌株属于完全不同的外膜蛋白型，血清型不同的菌株也为同一外膜蛋白型的分离株；四是制备原生质体融合出亲本菌株，选择两对相互之间的血清型和外膜蛋白型都不相同的菌株，作为融合子的筛选标记，将它们选作进行原生质体融合的亲本菌株；然后制备原生质体，原生质体融合后，培养形成中等大小菌落，得到鸡大肠杆菌异型外膜蛋白细胞工程菌株。 | ||
| 搜索关键词： | 大肠杆菌 异型 膜蛋白 细胞 工程 菌株 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种鸡大肠杆菌异型外膜蛋白细胞工程菌株的制备方法，具有如下步骤：首先进行细菌分离，将病料接种、培养，分离出的细菌冻存备用；第二步是对分离出的细菌进行鉴定，选出优势血清型O78、O88、O2、O45、O53、O145；第三步提取优势血清型菌株外膜蛋白(OMPs)，找出同一血清型的菌株属于完全不同的OMP型，而血清型不同的菌株也为同一OMP型的分离株；第四步是制备原生质体融合出亲本菌株，即选取两对相互之间的血清型和OMP型都不相同的菌株，将它们选作进行原生质体融合的亲本菌株；筛选融合子选择标记并确定亲本菌株：选择两对相互之间的血清型和OMP型都不相同，而对卡那霉素(K+)和氨苄西林(Amp+)交叉耐药的菌株，作为融合子的筛选标记，将它们选作进行原生质体融合的亲本菌株。第五步制备原生质体，用溶菌酶浓度为6g/L，作用时间为25min；原生质体融合后，培养2-3天形成中等大小菌落，得到鸡大肠杆菌异型外膜蛋白细胞工程菌株，R1：OMP-1+OMP-3，O78+O2；R2：OMP-1+OMP-2，O78+O88。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于天津市畜牧兽医研究所，未经天津市畜牧兽医研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/200310106662.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：食用菌的发酵方法
- 下一篇：防治棉花黄萎病的菌株及其菌剂的制备方法
