[发明专利]一种棉花分子遗传连锁作图的方法

摘要

本发明公开了一种利用SRAP分子标记进行棉花连锁遗传作图的方法。作图群体为海岛棉与陆地棉杂交产生F₂单株。应用序列相关扩增多态性(SRAP)分子标记，PCR扩增检测所述群体的多态性并进行遗传作图，得到285个多态性条带，平均每个引物组合产生3.75个多态性条带，最多可产生13条多态性条带，比现有棉花分子遗传连锁图构建的其它标记的产率高。对285个标记用MAPMAKER构建连锁群，237个标记进入39个连锁群，每个连锁群有2～13个标记，总长3030.7 cM，覆盖整个棉花基因组的65.4％，标记间平均间距12.79cM。标记在整个连锁群中分布比较均匀，没有标记聚集在一起的现象。本发明还提出了具体的分子标记操作的步骤和电泳参数。

主权项

1、一种评价棉花连锁遗传的方法，特别是棉花分子遗传连锁作图的方法，其特征在于按照下列步骤：1)以海岛棉品系Pima90为父本，陆地棉品种邯郸208为母本，配制杂交组合，将得到的F2单株作为遗传连锁作图的起始材料，并将所述的材料种植于田间；2)从所述的田间材料中取所述亲本和F2群体植株的嫩绿叶片提取其总DNA；3)应用序列相关扩增多态性(Sequence-related amplified polymorphism SRAP)分子标记，聚合酶链式反应(PCR)扩增引物检测所述群体的多态性并进行遗传作图，其中所述的引物序列如附图1所示：4)将步骤3)扩增的DNA片段进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，该方法包括先用2000伏电压预电泳至电流为30mA，上样后用2500伏恒压再电泳1.5～2h，在电泳过程中控制胶板温度不高于50℃；5)对步骤4)获得的凝胶片进行银染，染色时先染凝胶下部，待显出带后再染上部；6)结合凝胶片所显示的带型进行遗传连锁评价并作图。