[发明专利]水稻黄单胞hrf1基因重组载体及转基因植物育种方法无效
| 申请号： | 02157213.5 | 申请日： | 2002-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN1451754A | 公开（公告）日： | 2003-10-29 |
| 发明（设计）人： | 王金生;邵敏;董汉松;陈功友;高学文;李平;杨春 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/31;C12N15/52;C12N15/63;C12N5/10;A01H1/00;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京经纬专利代理有限责任公司 | 代理人： | 楼高潮 |
| 地址： | 21009*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明水稻黄单胞hrf1基因重组载体及转基因植物育种方法属于生物技术领域。以hrf1基因作为目的基因构建在植物表达的Ti－质粒双元载体pBI121上，获得基因重组载体，将构建的重组载体pBI121∷hrf1转化于EHA105中；转化植物细胞，外植体在植物再生培养基中筛选被转化的再生植株(T0代)，检测转化株系。hrf1基因转基因植物增强了植物广谱抗病虫能力并改善植物其他生产性状。图为35S∷hrf1基因重组载体构建图。 | ||
| 搜索关键词： | 水稻 黄单胞 hrf1 基因 重组 载体 转基因 植物 育种 方法 | ||
【主权项】：
1、一种水稻黄单胞hrf1基因重组载体是通过以下方法构建而成：(1)hrf1基因序列：如序列表SEQIDNO.1所示(2)以hrf1基因作为目的基因构建在植物表达的Ti-质粒双元载体pBI121上：用于构建双元转化—表达载体的质粒的是由T-DNA改造而来，其中除T-DNA25bp重复序列(LB和RB)，胭脂碱合成酶基因的启动子P-nos和终止子T-nos外，还有在原核生物(细菌)中作为选择标记使用的nptI和在真核生物(植物)中作为选择标记使用的nptII，用于选择的抗生素均为Km和G-418；另外在pBI121中还有在真核生物表达的花椰菜花叶病毒的启动子35S(p35S)和β-葡糖醛酸酶(Gus)基因uidA；作为目的基因使用的hrf1基因插入在pBI121质粒的p35S和uid之间的多酶切克隆位点上，所用内切酶为XbaI和BamHI，即获得基因重组载体。
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