[发明专利]生产重组色氨酸酶的表达系统及重组色氨酸酶的制备方法和应用无效
申请号: | 02139189.0 | 申请日: | 2002-10-18 |
公开(公告)号: | CN1497047A | 公开(公告)日: | 2004-05-19 |
发明(设计)人: | 王业富;龚睿 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C07K1/36;C12P13/22 |
代理公司: | 武汉科宏专利事务所 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 43007*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种生产重组色氨酸酶的表达系统及制备方法和应用,色氨酸酶的表达载体pEVT(CCTCCM202038),生产该载体的方法及一种纯化菌种产色氨酸酶蛋白的方法。采用本发明提供的重组载体表达的色氨酸酶融合蛋白,由于含有6个连续的组氨酸,这样易于结合在固定化的组氨酸-蛋白质镍亲和层析树脂柱上,而且这一段组氨酸不会对目的蛋白的活性造成影响。由此可以提高目的蛋白的回收率,并且回收的生产成本很低。这样,在后续的色氨酸生产过程中,就避免了直接将细菌裂解液加到反应底物中而造成的产物中混合物过多,最终色氨酸纯化困难的问题。采用本发明生产的色氨酸酶蛋白其纯度在95%以上,回收率在60%以上。 | ||
搜索关键词: | 生产 重组 色氨酸 表达 系统 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
1、一种生产重组色氨酸酶的表达系统,其特征在于重组色氨酸酶表达系统,Escheuchia coli BL21/pET-28a,CCTCC NO:M202038。
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