[发明专利]制备分枝型聚乙二醇的方法

摘要

本发明提供的制备分枝型聚乙二醇的方法，步骤如下：先分别制备氨基酸乙酯盐酸盐和羧甲基化的单甲氧基聚乙二醇，将其均匀混配后，再依次加入TEA，DCC，NHS，反应得到的产物脱保护后，再经过凝胶过滤分离，即可得到分枝型聚乙二醇，分枝型聚乙二醇应用广泛，即可修饰蛋白质等大分子，也可修饰小分子药物及表面；本发明的方法简单，易操作，而且只需保护赖氨酸的羧基，不需要活化的氨基和羧基；反应在室温进行，不需控制pH值；所用原料和试剂价格便宜；产率高达65％左右。

主权项

1、一种制备分枝型聚乙二醇的方法，其工艺步骤如下：1)制备氨基酸乙酯盐酸盐将氨基酸溶于无水乙醇，在搅拌条件下通入干燥的氯化氢气体至饱和，加热回流使氨基酸溶解，将此溶液放置过夜；然后减压蒸馏除去过量的乙醇和氯化氢；最后用无水乙醚，进行赖氨酸乙酯盐酸盐的结晶；再经过滤，洗涤，干燥得到赖氨酸乙酯盐酸盐淡黄色晶体；2)制备羧甲基化的单甲氧基聚乙二醇将mPEG溶于干燥的二氯甲烷中，加入活化的二氧化锰，均匀混合后，室温下搅拌过夜；过滤除去催化剂，通过减压蒸去溶剂得到中间氧化产物；将得到的中间氧化产物溶于体积比为3％过氧化氢水溶液，反应24小时后，通过Bio-RadAGi*2树脂柱，除去中性物质，再用0.02MHCl洗脱，得到羧甲基化的单甲氧基聚乙二醇；3)制备纯化的分枝型聚乙二醇(1)将步骤1所得的氨基酸乙酯盐酸盐与步骤2所得的羧甲基化的单甲氧基聚乙二醇以1∶2-4的摩尔比溶于干燥二氯甲烷中，然后加入过量的三乙胺，二环己基碳二亚胺，氮-羟基琥珀酰亚胺，室温下反应24小时后，过滤除去所生成的二环己基脲；然后加入冷乙醚沉淀，得到白色粉末状产物；将得到的白色粉末状产物溶于1NNaOH，加入氯化钠，反应1-2小时后，用盐酸将溶液调至pH＝3；然后用二氯甲烷萃取至少3次，将萃取所得的有机相合并，并用无水硫酸镁干燥，减压蒸馏浓缩，加入冷乙醚沉淀，得到白色粉末状的物质；(2)将上述所得产物，每0.2克溶于1毫升水，分批用BiogelP100(100-200mesh)5*50层析柱进行以水为洗脱液的洗脱分离，每管10毫升收集组分；将相对于分枝型聚乙二醇的组分合并，浓缩，然后用二氯甲烷抽提，乙醚沉淀，最后用乙醇结晶，得到纯化的分枝型聚乙二醇。