[发明专利]原发性胆汁性肝硬化症检测用抗原的制备和纯化技术

摘要

本发明原发性胆汁性肝硬化症检测用抗原的制备和纯化技术,属于生物医药体外检测与诊断技术技术领域。原发性胆汁性肝硬化症(PBC)是一种慢性进行性自身免疫疾病。AMAM2抗体诊断用抗原PDC－E2的表达与纯化技术采用基因工程方法，用原核表达系统表达二氢脂乙酰胺乙酰转移酶(DPAT)1－335氨基酸残基部分多肽，以与6His融合蛋白形式表达，用金属亲和层析纯化、肠激酶水解获得重组DPAT1－335多肽。重组PDC－E2抗原可采用酶联免疫法检测PBC抗AMAM2抗体，有助于早期特异性诊断PBC，并可与非PBCM2阳性肝硬化病例鉴别。本技术及其产品适用范围广，特异性高，有利于AMAM2抗体检测试剂的规模化生产。

主权项

丙酮酸脱氢酶复合体(PDC)E2抗原的表达与纯化技术及其应用属于生物医药领域体外检测与诊断技术。该技术采用基因工程原核表达法，在大肠杆菌中表达与硫氧还蛋白融合的PDCE2抗原-二氢脂乙酰胺乙酰转移酶(DPAT)1-335氨基酸残基的部分多肽，采用金属亲和层析法纯化融合蛋白，肠激酶水解获得重组PDCE2多肽抗原。用此多肽抗原酶联免疫法检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清中的抗线粒体抗体(AMA)M2抗体，作为PBC的特异性免疫学诊断试剂。本发明专利的权利要求如下：1、DPAT1--335氨基酸残基部分多肽序列的克隆表达与纯化技术。