[发明专利]锌指结构域及其鉴定方法无效
申请号: | 01806252.0 | 申请日: | 2001-02-17 |
公开(公告)号: | CN1416467A | 公开(公告)日: | 2003-05-07 |
发明(设计)人: | 金晋秀;权宁道;金炫元;柳银铉;黄文宣 | 申请(专利权)人: | 图尔金株式会社 |
主分类号: | C12N15/00 | 分类号: | C12N15/00 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 唐伟杰 |
地址: | 韩国大*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明公开了鉴定识别任何给定靶位点的锌指结构域的体内筛选方法。也公开了识别特定位点的锌指结构域的氨基酸序列。 | ||
搜索关键词: | 结构 及其 鉴定 方法 | ||
【主权项】:
1.一种鉴定识别DNA上靶位点的锌指结构域的方法,该方法包括:(a)提供包含报道构建体的细胞,所述构建体包含与启动子可操作连接的报道基因,其中当转录因子识别启动子的募集位点和靶位点两者时报道基因表达高于给定水平,但是当转录因子只识别启动子的募集位点时则不这样;(b)提供多个杂合核酸,其中每一个编码包含(i)转录激活结构域,(ii)识别募集位点的DNA结合结构域,和(iii)试验锌指结构域的非天然存在的蛋白质,其中编码的试验锌指结构域的氨基酸序列在所述多个杂合核酸的成员间各不相同;(c)在使得所述多个杂合核酸中的至少一个进入至少一个细胞的条件下使所述多个杂合核酸接触所述细胞;(d)在使杂合核酸在所述细胞中表达的条件下保持所述细胞;和(e)鉴定含有(b)的杂合核酸并且报道基因表达高于给定水平的细胞,报道基因表达高于给定水平是细胞包含编码识别靶位点的试验锌指结构域的杂合核酸的指征。
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