[发明专利]海水鱼淋巴囊肿病毒的纯化方法无效

专利信息
申请号: 01107824.3 申请日: 2001-02-23
公开(公告)号: CN1132936C 公开(公告)日: 2003-12-31
发明(设计)人: 孙修勤;曲凌云;张进兴 申请(专利权)人: 国家海洋局第一海洋研究所
主分类号: C12N7/02 分类号: C12N7/02
代理公司: 青岛海昊知识产权事务所有限公司 代理人: 张中南
地址: 266061*** 国省代码: 山东;37
权利要求书: 暂无信息 说明书: 暂无信息
摘要: 发明涉及一种海水鱼淋巴囊肿病毒的纯化方法。它是采用微孔滤膜过滤法和蔗糖密度梯度离心法相结合的方法,并考虑到尽量减小污染和保证无菌操作条件制成。本发明的特点是可以获得高纯度和高得率的淋巴囊肿病毒,以满足制备疫苗或作为病毒基因学、致病基因筛选和克隆技术使用的病毒。
搜索关键词: 海水 淋巴 囊肿 病毒 纯化 方法
【主权项】:
1、一种海水鱼淋巴囊肿病毒的纯化方法,其特征步骤是A、取病鱼体表囊肿物每20g左右,用无菌生理盐水多次洗净,再用组织研磨器研碎,然后加无菌TE缓冲液200ml,在室温下、-20℃冻融4次,之后将上述融液用孔径为8、3、0.8和0.3μm的微孔滤膜从大到小依次抽滤,再将滤液移入透析袋中用聚乙二醇2000浓度缩至7ml左右,便可取得该病毒悬液移入无菌的试管中,B、将配制好浓度为50%、40%、30%、20%和15%的蔗糖溶液,各取1ml,依次注入离心管中、并静静重层,然后,吸上述滤膜过滤的病毒悬液1ml,静静注于离心管内重层的蔗糖溶液上方2400rmp离心2小时,离心后即得纯度高的病毒。
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