[发明专利]一种基因芯片逆转录探针标记的方法无效
| 申请号： | 00115000.6 | 申请日： | 2000-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN1314594A | 公开（公告）日： | 2001-09-26 |
| 发明（设计）人： | 毛裕民;谢毅;李瑶 | 申请（专利权）人： | 上海博道基因开发有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543;G01N33/533;G01N33/68;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 200092 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种基因芯片逆转录探针标记方法,该方法提供了反转录酶、碱基随机引物、OligodT混合物、不带荧光标记的核苷酸以及带荧光标记的核苷酸等试剂的优选的用量范围,其优点是①节约荧光标记核苷酸和的用量,节约成本;②节约了SuperScriptⅡ酶(200U)的用量。③使用O1igodT和6碱基随机引物,标记效率提高1倍左右。④增强了杂交信号约3倍左右。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基因芯片 逆转录 探针 标记 方法 | ||
【主权项】：
1、一种基因芯片逆转录探针标记的方法，其中使用的试剂包括反转录酶、碱基随机引物、OligodT混合物、不带荧光标记的核苷酸以及带荧光标记的核苷酸，其特征在于至少有一种所述试剂的用量是选用以下所列的优选数值范围：(1)不带荧光标记的核苷酸与带荧光标记的核苷酸与用量比范围为1∶1-1∶1.5,二者总浓度为20-80μM；(2)同时使用碱基随机引物和OligodT，二者的比值范围为0.25-2；(3)SuperScriptⅡ酶的用量范围为150U/50μL-250U/50μL；
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