[发明专利]一种基因芯片逆转录探针标记的方法无效
申请号: | 00115000.6 | 申请日: | 2000-03-20 |
公开(公告)号: | CN1314594A | 公开(公告)日: | 2001-09-26 |
发明(设计)人: | 毛裕民;谢毅;李瑶 | 申请(专利权)人: | 上海博道基因开发有限公司 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/533;G01N33/68;C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200092 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基因芯片 逆转录 探针 标记 方法 | ||
1、一种基因芯片逆转录探针标记的方法,其中使用的试剂包括反转录酶、碱基随机引物、Oligo dT混合物、不带荧光标记的核苷酸以及带荧光标记的核苷酸,其特征在于至少有一种所述试剂的用量是选用以下所列的优选数值范围:(1)不带荧光标记的核苷酸与带荧光标记的核苷酸与用量比范围为1∶1-1∶1.5, 二者总浓度为20-80μM;(2)同时使用碱基随机引物和Oligo dT,二者的比值范围为0.25-2;(3)SuperScriptⅡ酶的用量范围为150U/50μL-250U/50μL;
2、如权利要求1所述的基因芯片逆转录探针标记的方法,其特征在于,反应中,不带荧光标记的核苷酸与带荧光标记的核苷酸与用量比为1∶1,二者总浓度为20μM。
3、如权利要求1所述的基因芯片逆转录探针标记的方法,其特征在于,同时使用的6碱基随机引物和Oligo dT二者的浓度比值为1∶1。
4、如权利要求1所述的基因芯片逆转录探针标记的方法,其特征在于,SuperScriptⅡ酶的用量为200U/50uL。
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