本发明提供了一种用于敲除人CYP2E1基因的sgRNA序列,所述sgRNA的靶DNA序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示序列中的至少一条。本发明还提供了一种敲除人胚胎肾脏细胞CYP2E1基因的方法,为利用CRISPR/Cas系统在人胚胎肾脏细胞中对CYP2E1基因进行改造。本发明还提供了一种CYP2E1基因敲除细胞株,CYP2E1参与机体重要的代谢功能,本发明提供的CYP2E1基因敲除细胞株为外源性化学物或者外源性毒物在体内的代谢研究提供了有效的平台,对于慢性疾病(如酒精性肝脏疾病及糖尿病)及肿瘤相关疾病的研究提供了有力工具。