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[发明专利]一种提高麦芽四糖产量的方法-CN202211009956.9在审
发明人：李兆丰;段凯文;王颖兰;李才明;班宵逢;顾正彪;程力;洪雁 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-08-22 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： C12P19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高麦芽四糖产量的方法，属于基因工程和生物技术。本发明提供的直链麦芽低聚糖生成酶MFAPS‑ΔCBM酶活为310U/mL，比酶活为1802U/mg，相较于野生型(230U/mL，1200U/mg)分别提高了34.8％和50.2％。本发明通过将来源于Pseudomonassaccharophila的直链麦芽低聚糖生成进行突变得到产物中麦芽四糖占比提高的直链麦芽低聚糖生成酶MFAPS‑ΔCBM，其催化得到的产物中麦芽四糖占比达到了73.1％，具有良好的工艺适应性，在生物领域具有广阔的应用前景。
一种提高麦芽产量方法

[发明专利]一种用双酶法制备直链麦芽五糖的方法-CN201810219837.3有效
发明人：李兆丰;顾正彪;潘思惠;李才明;王颖兰;程力;洪雁 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-03-16 - 公布日： 2021-03-02 - 主分类号： C12N9/26 文献下载
摘要：本发明涉及一种用双酶法制备直链麦芽五糖的方法，属于功能糖生产技术领域。所用直链麦芽低聚糖生成酶的氨基酸序列在GenBank中的编号为AIV43245.1，所用普鲁兰酶购自日本天野酶制剂集团。配制pH 5.5～6.5的淀粉或麦芽糊精溶液为底物，按50～100U/g加酶量加入直链麦芽低聚糖生成酶，按2～5U/g加酶量加入普鲁兰酶，于60～70℃下反应24～72小时后得到直链麦芽低聚糖浆，转化率(以葡萄糖～直链麦芽七糖计)达90％以上。其中主产物为直链麦芽五糖，百分比例可达40％以上。本发明所用的两种酶可同时加入，不需要中途调节反应温度或pH，也不需要α‑淀粉酶液化底物，不需要添加钙离子，生产工艺简单、安全且经济，具有较大的应用价值。
一种用双酶法制直链麦芽方法

[发明专利]一种直链麦芽五糖生成酶在枯草芽孢杆菌中分泌表达的方法-CN201910284685.X在审
发明人： 王颖兰;蒋自航;刘思宇;冯焱;李兆丰 -专利权人：江南大学
申请日： 2019-04-10 - 公布日： 2019-05-31 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种直链麦芽五糖生成酶在枯草芽孢杆菌中分泌表达的方法，属于酶工程技术领域。本发明通过构建G5‑淀粉酶的枯草芽孢杆菌分泌表达系统，并对基因工程菌的摇瓶发酵条件进行优化，最终确定较佳培养基组成为：酵母粉30g/L，玉米淀粉6g/L，KH₂PO₄2.3g/L，K₂HPO₄12.5g/L，pH 7.5。在发酵温度37℃，200r/min下振荡培养48h后酶活达451.1U/mL，比初始培养条件下的酶活水平提高了127.5％，比文献报道水平提高了10.9倍。
枯草芽孢杆菌麦芽分泌表达酶活五糖直链淀粉酶分泌表达系统基因工程菌酶工程技术培养基组成培养条件摇瓶发酵玉米淀粉振荡培养酵母粉构建发酵优化