本发明公开了一种LSDV和GTPV的通用型诊断抗原及其单克隆抗体,该抗原编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,本发明还公开了一种利用该抗原和单克隆抗体建立的牛结节性皮肤病诊断试剂盒,属于免疫学领域。本发明的抗原是经蛋白免疫印迹试验结合质谱测序从LSDV基因组中筛选到的一种通用型诊断靶标,具有免疫原性,利用其制备的单克隆抗体可实现对山羊痘病毒属的LSDV和GTPV感染或免疫血清抗体检测,具有灵敏性和特异性高,检测快速便捷等优点。本发明为LSDV的血清学检测和疫苗免疫评价提供了高价值工具。