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[发明专利]脐血血浆精华液或其冻干粉剂的制备方法-CN201811627127.0有效
发明人： 李诣书;王正 -专利权人：英科博雅生命科技有限公司
申请日： 2018-12-28 - 公布日： 2022-06-24 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明涉及脐血血浆精华液或其冻干粉剂的制备方法。具体的，一方面涉及制备脐血血浆精华液或其冻干粉剂的方法，该方法包括如下步骤：提取分离脐血血浆，使其用CaCl2溶液激活，孵育，离心，得到脐血血浆精华液，任选地将其冷冻干燥制成冻干粉剂。本发明还提供了一种脐血血浆以及其提取分离的方法。本发明方法及其所得的脐血血浆精华液或其冻干粉剂以及脐血血浆呈现如说明书所述优异技术效果。
血浆精华液粉剂制备方法

[发明专利]简易制备胎盘间充质干细胞外泌体的方法-CN201910819070.2有效
发明人：刘冰;肖海蓉;李诣书 -专利权人：博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2019-08-30 - 公布日： 2021-07-23 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及由胎盘间充质干细胞简易制备细胞因子的方法。简易制备胎盘间充质干细胞外泌体的方法。具体的，涉及从胎盘间充质干细胞中分离提取外泌体的方法，包括如下步骤：培养胎盘间充质干细胞获得培养上清；将培养上清经葡聚糖凝胶柱层析得到层析液；使用切向流超滤系统对层析液进行浓缩，得到外泌体浓缩液；将外泌体浓缩液冷冻保存或者冷冻干燥。本发明方法呈现如说明书所述优异性质。
简易制备胎盘间充质干细胞外泌体方法

[发明专利]由胎盘间充质干细胞简易制备细胞因子的方法-CN201910819093.3有效
发明人：刘冰;肖海蓉;李诣书 -专利权人：博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2019-08-30 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明涉及由胎盘间充质干细胞简易制备细胞因子的方法。一方面，涉及从胎盘间充质干细胞中分离提取外泌体和细胞因子的方法，包括如下步骤：培养胎盘间充质干细胞获得培养上清；将培养上清经葡聚糖凝胶柱层析得到层析液；使用切向流超滤系统对层析液进行浓缩，得到外泌体浓缩液，同时得到的超滤过滤液再次使用切向流超滤系统对层析液进行浓缩进行过滤浓缩细胞因子浓缩液；将外泌体浓缩液或细胞因子浓缩液冷冻保存或者冷冻干燥。还涉及制备细胞因子浓缩液的方法。本发明方法呈现如说明书所述优异性质。
胎盘间充质干细胞简易制备细胞因子方法

[发明专利]分离提取脐血血浆的方法-CN201811627126.6有效
发明人： 李诣书;王正 -专利权人：英科博雅生命科技有限公司
申请日： 2018-12-28 - 公布日： 2020-12-18 - 主分类号： B01D17/02 文献下载
摘要：本发明涉及分离提取脐血血浆的方法。具体的，一方面涉及一种分离脐血血浆的方法，包括如下步骤：提供生产时采集的新鲜脐血置于血袋中，运回实验室待处置；外周血进行病毒检测，以确保脐血样本的安全性；从血袋中抽出脐血样本，将其与生理盐水稀释，充分混匀；将ficoll分离液加至离心管中，缓慢加入步骤(3)所得脐血稀释液，离心，脐血分成三层；缓慢抽取上层血浆，取适量用于微生物检测，其余置于‑50℃以下例如置于‑80℃冷冻保存，分离得到脐血血浆；另外依次分别缓慢吸出中间层、分离液层和下层，另行处理。本发明还涉及由此方法制得的脐血血浆。本发明方法呈现如说明书所述优异技术效果。
分离提取血浆方法

[发明专利]从胎盘中富集血小板和提取活性因子的方法-CN201710285583.0有效
发明人： 李诣书;王芳;周丹;梅俊;尚聪;汤乐 -专利权人：博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2017-04-27 - 公布日： 2020-10-09 - 主分类号： A61K8/98 文献下载
摘要：本发明涉及从胎盘中富集血小板和提取活性因子的方法。具体地说，从胎盘中富集血小板和提取活性因子的方法，其包括以下步骤：(1)血小板富集；(2)血小板裂解物制备，根据血小板浓度将步骤(1)富集的血小板样本稀释；化学裂解：按照沉淀体积：激活剂＝1：5‑10进行血小板激活；室温静止，进行离心，分别收集上清液和沉淀，上清液至4摄氏度冰箱保存；物理裂解：将上一步骤收集的沉淀进行37摄氏度/‑80摄氏度反复冻融三次裂解，得裂解物；将上面步骤收集的上清液和裂解后产物充分混匀得裂解物；(3)血小板源性活性因子冻干与保存。还涉及一种冻干粉。本发明方法具有如本发明说明书所述有益效果。
胎盘富集血小板提取活性因子方法

[发明专利]从胎盘富集血小板和提取活性因子制备的冻干粉-CN201710285584.5有效
发明人： 李诣书;王芳;梅俊;尚聪;汤乐 -专利权人：博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2017-04-27 - 公布日： 2020-10-09 - 主分类号： A61K8/98 文献下载
摘要：本发明涉及一种包含活性因子的冻干粉，所述活性因子是通过从胎盘中富集血小板并提取获得的，所述活性因子选自：EGF、PDGF‑BB、FGF、HGF及其组合，所述冻干粉中包含活性因子以及冻干保护剂，冻干保护剂选自海藻糖、甘露醇、壳聚糖或其组合。所述冻干粉从胎盘中富集血小板和提取活性因子的方法包括以下步骤：血小板富集、血小板裂解物制备、血小板源性活性因子冻干与保存。本发明冻干粉及其制备方法具有如本发明说明书所述有益效果。
胎盘富集血小板提取活性因子制备干粉

[发明专利]制备富血小板血浆PRP的方法及该富血小板血浆的用途-CN201611074599.9有效
发明人： 李诣书;尚聪;梅俊;周丹 -专利权人：英科博雅生命科技有限公司
申请日： 2016-11-29 - 公布日： 2020-07-31 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明涉及制备富血小板血浆PRP的方法及该富血小板血浆的用途。具体地说，本发明涉及从血液中提取富血小板血浆的方法，其包括以下步骤：(a)使采集的全血置于含有抗凝剂的容器中，使血液和抗凝剂充分混匀；(b)使混有抗凝剂的血液置于离心管中，进行第一次离心，使血液基本上分成三层；(c)将最上层和大部分的中间层抽出并转移到新的离心管中，混合均匀，进行第二次离心；(d)弃掉离心管上层的血浆，利用剩余的血浆使沉淀的血小板重新悬浮，即得富血小板血浆。本发明还涉及本发明方法制备得到的富血小板血浆，以及其在制备健康产品中的用途，例如用于骨科、口腔科、颌面外科、运动医学以及美容医学。
制备血小板血浆 prp 方法用途

[发明专利]自体脂肪间充质干细胞的培养方法和使用的培养基-CN201710653584.6有效
发明人： 李诣书;周丹;王正 -专利权人：广州中科博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2017-08-02 - 公布日： 2020-07-31 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及自体脂肪间充质干细胞的培养方法和使用的培养基。具体的说，本发明涉及的培养方法包括如下步骤培养预处理、贴壁培养、补液与换液、一次或任选的多次的细胞传代、以及任选的制备脂肪间充质干细胞的制剂和任选的对所得脂肪间充质干细胞进行细胞冻存、复苏。本发明的培养基中包括DMEM和FBS。使用本发明培养基培养所述自体脂肪间充质干细胞特别是眼部脂肪细胞的自体脂肪间充质干细胞时，能够呈现本发明所述优异技术效果。得到的这些自体脂肪间充质干细胞可以用于自体应用，例如由眼部脂肪得到的自体脂肪间充质干细胞可用于面部注射，例如于面部皱纹、太阳穴、泪沟等部位的注射填充。
脂肪间充质干细胞培养方法使用培养基

[发明专利]富血小板血浆冻干粉及制法和用途-CN201611074600.8有效
发明人： 李诣书;尚聪;梅俊;周丹 -专利权人：英科博雅生命科技有限公司
申请日： 2016-11-29 - 公布日： 2019-04-30 - 主分类号： A61K9/19 文献下载
摘要：本发明涉及富血小板血浆冻干粉及制法和用途。具体涉及从血液中提取富血小板血浆并制备其冻干粉的方法，包括步骤：(a)使全血置含抗凝剂的容器中，使血液和抗凝剂混匀；(b)使该血液置于离心管中，进行一次离心，使之分成三层；(c)将最上层和大部分的间层抽出并转移到新离心管，混合均匀，进行二次离心；(d)弃离心管上层血浆，用剩余血浆使沉淀的血小板重新悬浮，即得富血小板血浆；(e)向该富血小板血浆中添加冻干赋形剂，冷冻干燥，即得。还涉及本发明方法制得的冻干粉，以及其用途，例如用于骨科、口腔科、颌面外科、运动医学以及美容医学。本发明冻干粉中包括冻干赋形剂并且该冻干粉具有优异技术效果。
血小板血浆干粉制法用途

[发明专利]从成人外周血中自动化分离免疫细胞并提取PRP的方法-CN201510113954.8有效
发明人：许晓椿;李诣书;周丹;肖海蓉 -专利权人：第五空间健康管理江苏有限公司
申请日： 2015-03-16 - 公布日： 2017-09-15 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明涉及一种简单有效的从成人外周血中自动化分离免疫细胞并提取PRP的方法，特别是涉及一种使用AXP全自动细胞分离设备来从外周血中自动分离免疫细胞并提取富血小板血浆的方法，以及相配套使用的冻存和复苏的方法，以及复苏后免疫细胞扩增的方法，其包括如下步骤全血样本预处理、自动分离、单个核细胞收集和任选的对所得免疫细胞检测以下项目的至少一项单个核细胞总数、单个核细胞活率、细胞污染、遗传病、HLA‑ABC/DR配型。本发明发现使用特定操作步骤的提取、冻存、复苏以及扩增，可以有效地获得免疫细胞，该免疫细胞可用于治疗肿瘤。并且本发明还可以有效地获得富血小板血浆，以便为临床提供有效的治疗手段。
成人外周血中自动化分离免疫细胞提取 prp 方法

[实用新型]用于采集和存放脐带血、脐带和胎盘的采集盒-CN201320067485.7有效
发明人：陈俊峯;李诣书;许晓椿;张焱 -专利权人：博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2013-02-06 - 公布日： 2013-11-06 - 主分类号： A61B5/15 文献下载
摘要：本实用新型提供一种用于采集和存放脐带血、脐带和胎盘的采集盒，所述采集盒包括：盒体，其一面开口，且以隔断将盒体内部空间分隔成上腔室和下腔室两个部分；盒盖，其通过连接边与盒体的底沿连成一体，使得所述盒盖能够将盒体的开口一面密合；脐带血/脐带盒，其外沿尺寸与所述盒体内的上腔室配合且可通过抽屉的方式置于所述盒体内的上腔室中或者从所述上腔室中抽出；胎盘盒，其外沿尺寸与所述盒体内的下腔室配合且可通过抽屉的方式置于所述盒体内的下腔室中或者从所述下腔室中抽出。本实用新型的采集盒可将采集脐带血、脐带和胎盘的用具以及采集到的脐带血、脐带和胎盘有序地放置在采集盒内，这为助产士采集脐带血、脐带和胎盘带来极大的便利。
用于采集存放脐带血脐带胎盘

[实用新型]用于采集和存放胎盘的采集盒-CN201320070326.2有效
发明人：陈俊峯;李诣书;许晓椿;冯迹 -专利权人：博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2013-02-06 - 公布日： 2013-10-23 - 主分类号： A61J1/00 文献下载
摘要：本实用新型提供一种用于采集和存放胎盘的采集盒，所述采集盒包括：盒体，所述盒体包括下盒体和盒盖；内衬支撑体，所述内衬支撑体放置在所述下盒体中，并且其外部尺寸与所述下盒体的内腔尺寸相匹配，所述内衬支撑体中开有多个凹槽，所述凹槽用于放置采集、存放胎盘的器具；拎手，所述拎手固定在盒体上，用于采集盒的拿取。本实用新型的胎盘采集盒的优点在于：用于采集胎盘的用具有序地放置在采集盒内，这为助产士采集胎盘带来极大的便利；本实用新型的采集盒中的器具在采集盒内的位置相对固定，在运输途中不会相互碰撞，并且本实用新型的采集盒中的内衬支撑体具有优异的缓冲性能，保证了器具的安全性。
用于采集存放胎盘

[发明专利]从胎盘中分离间充质干细胞的方法-CN201210044648.X有效
发明人：霍思维;陈俊峯;张毅;许晓椿;李诣书 -专利权人：博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2012-02-27 - 公布日： 2012-09-19 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及从胎盘中分离间充质干细胞的方法。所述方法包括(a)取胎盘小叶，用PBS缓冲液充分冲洗，以去除胎盘中残留的血液；(b)将胎盘小叶剪成块状，加入含有组织消化酶的PBS缓冲液，再在37℃孵育消化；(c)将组织块用铜网过滤，必要时研磨以促使过滤；(d)将收集的过滤液离心，分离单个核细胞，再用MSC培养基悬浮所获得的细胞，然后在37℃、5％CO2培养箱中培养；(e)待散在细胞形成克隆后，挑取各克隆细胞，用MSC培养基分别培养，待细胞融合后，用胰酶消化传代，即得胎盘间充质干细胞。通过本发明方法可以获得高纯度的胎盘间充质干细胞。
胎盘中分离间干细胞方法

[发明专利]建立胎盘间充质干细胞库的方法-CN201210044638.6有效
发明人：霍思维;陈俊峯;张毅;许晓椿;李诣书 -专利权人：博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2012-02-27 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及建立胎盘间充质干细胞库的方法。所述方法包括将胎盘小叶用含有组织消化酶的PBS缓冲液消化，分离单个核细胞，再用MSC培养基悬浮所获得的细胞，然后在37℃、5％CO2培养箱中培养，待散在细胞形成克隆后，用MSC培养基分别培养各克隆细胞，待细胞融合后，用胰酶消化传代，即得胎盘间充质干细胞，再针对所得胎盘间充质干细胞，检测以下项目的至少一项：细胞活性、细胞污染、遗传病、HLA-ABC/DR配型，另外将传代后的胎盘间充质干细胞于液氮中冻存，再建立包含以上信息的胎盘干细胞的数据库，并使该数据库与冻存细胞进行关联。本发明方法所涉及的胎盘间充质干细胞纯度高。
建立胎盘间充质干细胞方法

[发明专利]离体生物样品生命周期品质监控和溯源的方法和系统-CN201110235644.5无效
发明人： 李诣书;许晓椿 -专利权人：无锡尚诣纳米技术有限公司
申请日： 2011-08-17 - 公布日： 2011-12-28 - 主分类号： G06K17/00 文献下载
摘要：本发明提供一种离体生物样品生命周期的品质监控和溯源的系统和方法，其特征在于：样品从采集后到样品入库存储之间的过程中始终保持在规定的温度下，各个环节交接时无需开箱检查，并完整地记录了整个过程中每个样品本身的温度信息、各环节的操作人员信息、操作时间等重要信息，操作简单迅速，缩短了交接时间，提高了样品流通速率；系统管理人员可以通过PC客户端详细了解在运样品、已入库样品的温度信息和与样品关联的用户相关资料，出现问题时可以迅速追踪问题原因和相关责任人。
生物样品生命周期品质监控溯源方法系统

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