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[发明专利]新型植物碱基编辑器pAYBEs-CN202310577566.X在审
发明人：夏兰琴;李玉才;李少雅;林勇;张阳军 -专利权人：中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2023-05-22 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明公开了新型植物碱基编辑器pAYBEs。本发明通过将腺嘌呤碱基编辑器与hMPG融合，在植物中建立了第一代A‑to‑Y单碱基编辑系统pAYBEv1，进一步通过将hMPG替换为mhMPG建立了第二代A‑to‑Y单碱基编辑系统pAYBEv2，在此基础上，又通过将反式激活因子Vp64分别融合在pAYBEv1和pAYBEv2中的TadA8e‑nCas9(D10A)的N端，建立了第三代单碱基编辑系统pAYBEv3和第四代单碱基编辑系统pAYBEv4。本发明构建的植物AYBE单碱基编辑系统不仅丰富了植物单碱基编辑工具箱，也为水稻和其它农作物重要基因功能分析和遗传改良提供重要技术支撑。
新型植物碱基编辑器 paybes

[发明专利]通过CRISPR/Cas9技术调控小麦ARE1基因提高作物产量的方法-CN202110775203.8有效
发明人：夏兰琴;张佳慧;李少雅;李晶莹;闫磊 -专利权人：中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2021-07-08 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明公开了通过CRISPR/Cas9技术调控小麦ARE1基因提高作物产量的方法。本发明提供了一种制备基因编辑小麦的方法，包括使受体小麦基因组ARE1基因发生突变导致ARE1蛋白活性和/或丰度降低，获得所述基因编辑小麦，所述转基因小麦具有下述至少一种特性的：(1)与所述受体小麦相比，所述基因编辑小麦的产量提高；(2)与所述受体小麦相比，所述基因编辑小麦的衰老延缓；(3)与所述受体小麦相比，所述基因编辑小麦的氮素利用率提高。本发明实施例利用CRISPR/Cas9技术，定点编辑小麦氮素利用效率相关基因ARE1基因，通过造成移码突变，敲除了小麦ARE1基因，获得了产量明显提高的新一代小麦新种质。
通过 crispr cas9 技术调控小麦 are1 基因提高作物产量方法

[发明专利]一种CRISPR/Cas9系统介导的小麦多基因敲除编辑体系-CN202110175765.9有效
发明人：夏兰琴;罗金满;马有志;李少雅;徐佳竞;闫磊 -专利权人：中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2021-02-09 - 公布日： 2022-11-08 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种CRISPR/Cas9系统介导的小麦多基因敲除编辑体系，所述体系包括一种重组载体，所述重组载体含有骨架结构，所述骨架结构由Ubi启动子、核定位序列、Cas9基因、核定位序列、E9终止子、Actin启动子、tRNA编码基因、n个DNA片段1、PolyA序列与Nos终止子连接得到，n为2‑5间的自然数，所述DNA片段1由gRNA编码基因与tRNA编码基因连接得到。本专利利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和tRNA自剪切同时释放多个sgRNAs策略，在小麦中实现了同时靶向2个、3个、4个和多达15个基因组的5个基因的敲除编辑，仅在一代中就实现了多个优异等位基因的聚合。
一种 crispr cas9 系统小麦多基因编辑体系

[发明专利]一种通过借助代理引导编辑器进行水稻多基因精准编辑的方法-CN202210466252.8在审
发明人：夏兰琴;李慧园;朱紫薇;李少雅;闫磊 -专利权人：中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2022-04-29 - 公布日： 2022-08-16 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过借助代理引导编辑器进行水稻多基因精准编辑的方法。本发明提供了一种载体，该载体能表达抗生素抗性筛选标记蛋白和由Cas9缺刻酶和逆转录酶或其变体融合而成的融合蛋白，并含有DNA片段甲；DNA片段甲含有：1)启动子；2)polyA和终止子序列；及位于1)和2)之间的DNA序列I和插入位点；DNA序列I能表达靶向OsALS基因且将OsALS基因编码蛋白的第627位丝氨酸突变为异亮氨酸的成套向导RNA；成套向导RNA为自5’端到3’端依次由tRNA、pegRNA、tRNA、sgRNA和tRNA组成的一条串联排列序列。本发明的代理引导编辑器(PE3‑AS、PE3‑DS)可以大大提高引导编辑介导的基因精准编辑效率，且可在水稻中实现引导编辑介导的高效多基因精准编辑。
一种通过借助代理引导编辑器进行水稻多基因精准编辑方法

[发明专利]TaVQ25基因在调控小麦对白粉病和纹枯病抗性中的应用-CN202010895147.7有效
发明人：夏兰琴;田金福;李少雅 -专利权人：中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2020-08-31 - 公布日： 2022-04-08 - 主分类号： C07K14/415 文献下载
摘要：本发明公开了TaVQ25基因在调控小麦对白粉病和纹枯病抗性中的应用，所述基因为茉莉酸信号传导相关的基因TaVQ25，编码TaVQ25蛋白。本发明采用CRISPR/Cas9技术敲除了小麦TaVQ25基因，获得了白粉病和纹枯病抗性明显提高的小麦新种质。本发明提高了小麦抗白粉病和纹枯病的能力，创新了小麦抗病种质资源，对新品种培育、环境卫生和粮食安全具有重要意义，具有重大的应用推广价值。
tavq25 基因调控小麦白粉病纹枯病抗性中的应用

[发明专利]通过抑制小麦中TaVQ5基因的表达提高小麦抗病性的方法-CN202010895136.9有效
发明人：夏兰琴;田金福;李少雅 -专利权人：中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2020-08-31 - 公布日： 2022-01-04 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过抑制小麦中TaVQ5基因的表达提高小麦抗病性的方法。本发明采用CRISPR/Cas9技术，定点编辑TaVQ5基因，通过造成移码突变，敲除了小麦TaVQ5基因，获得了白粉病和纹枯病抗性明显提高的小麦新种质。本发明提高了小麦抗白粉病和纹枯病的能力，创新了小麦抗病种质资源，对新品种培育、环境卫生和粮食安全具有重要意义，具有重大的应用推广价值。
通过抑制小麦 tavq5 基因表达提高抗病性方法

[发明专利]LbCpf1-RR突变体用于CRISPR/Cpf1系统在植物基因编辑中的应用-CN201810217936.8有效
发明人：夏兰琴;李少雅;赵云德;张欣;王文生;杜文明 -专利权人：中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2018-03-16 - 公布日： 2021-02-19 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了LbCpf1‑RR突变体用于CRISPR/Cpf1系统在植物基因编辑中的应用。本发明以OsPDS基因和OsSBEIIb基因为靶基因，构建了靶向一个基因的双位点和两个基因的系列载体，并利用农杆菌转化方法将载体导入水稻愈伤中，利用LbCpf1‑RR突变体成功获得了目的基因敲除的水稻植株。LbCpf1‑RR突变体与蛋白质LbCpf1的唯一不同在于：第532位的氨基酸由G变为R，第595位的氨基酸由K变为R。本发明提供的LbCpf1‑RR突变体由于扩充了其识别的PAM位点序列，所以扩大了CRISPR/Cpf1系统在水稻基因组中的编辑范围，对于推进此系统在植物基因组编辑领域中的应用有重要意义。本发明具有重大的应用价值。
lbcpf1 rr 突变体用于 crispr cpf1 系统植物基因编辑中的应用

[发明专利]一种CRISPR/Cpf1系统介导的以RNA转录本为修复模板的同源重组方法-CN201810385845.5有效
发明人：夏兰琴;李少雅;赵云德;李晶莹;杜文明;张佳慧 -专利权人：中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2018-04-26 - 公布日： 2021-02-12 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种CRISPR/Cpf1系统介导的以RNA转录本为修复模板的同源重组方法。本发明以水稻ALS基因为研究对象，构建了同源重组载体。将RCR1‑RCR2‑RDR片段进行体外转录，通过RNP方法，以RNA转录本作为修复模板，在水稻愈伤中实现了目的基因的同源重组修复。同时，利用基因枪方法将载体导入水稻愈伤中，获得了ALS基因定点修饰的水稻植株。结果表明，以RNA作为修复模板可成功介导目的基因的同源重组，为农作物育种提供了新思路，因此在农业育种方面具有强大的应用潜力。
一种 crispr cpf1 系统 rna 转录修复模板同源重组方法

[发明专利]一种利用CRISPR/LbCpf1系统实现目的基因在植物中同源重组的方法-CN201810385868.6有效
发明人：夏兰琴;李少雅;赵云德;李晶莹;张佳慧;杜文明 -专利权人：中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2018-04-26 - 公布日： 2020-08-07 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用CRISPR/LbCpf1系统实现目的基因在植物中同源重组的方法。本发明以水稻ALS基因为研究对象，构建了同源重组载体。载体甲采用OsU3作为启动子，启动crRNAs的转录，且载体中的修复模板只含有左侧同源臂。载体乙同样采用OsU3作为启动子，启动crRNAs的转录，但载体中的修复模板含有两个同源臂。利用基因枪方法将载体与外源片段同时转入水稻愈伤中，获得了ALS基因定点修饰的水稻植株。研究结果一方面表明，当双链DNA作为修复模板时，细胞采用SDSA模型进行同源重组修复，且当修复模板中只含有左侧同源重组臂时同样可成功介导目的基因的同源重组，此策略使得载体构建更为简单。
一种利用 crispr lbcpf1 系统实现目的基因植物同源重组方法

[实用新型]一种口腔内外正畸修复仪-CN201620081561.3有效
发明人：王彩虹;张文彬;李少雅 -专利权人：王彩虹
申请日： 2016-01-27 - 公布日： 2016-06-15 - 主分类号： A61G15/04 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种口腔内外正畸修复仪，修复仪躺椅包括躺椅本体和折叠部分，躺椅本体下部设有升高柱I，升高柱I上设有控制杆I，升高柱I下部设有固定盘I，折叠部分下部设有升高柱II,升高柱II上设有控制杆II,升高柱II下部设有固定盘II，升高柱II上部设有固定板，可调光口腔冷光灯通过连接杆连接在躺椅本体一侧的扶手上，连接杆包括L形连接杆和转动杆，L形连接杆下部还设有横杆，横杆通过加长杆进一步连接用具陈列台，提供一种口腔内外正畸修复仪，功能多样，设置合理，使用方便，无需复杂的电控系统，就可以实现对多个部件高度和角度的调节变换，智能高效，清洁卫生，结构简单，实用性较强。
一种口腔内外修复

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