本发明公开了一种猪瘟和猪伪狂犬二联疫苗，由猪伪狂犬病病毒gB抗原、猪瘟病毒E2抗原插入到复制缺陷型黑猩猩腺病毒穿梭载体上制备而得，其中猪伪狂犬病病毒gB抗原基因序列为SEQ ID No.1，猪瘟病毒E2抗原基因序列如SEQ ID No.2所示。还公开了其制备方法，包括1)、制备猪瘟病毒抗原蛋白E2基因与猪伪狂犬病病毒抗原蛋白gB基因；(2)、构建重组复制缺陷型黑猩猩腺病毒穿梭载体；(3)、获得复制缺陷型黑猩猩腺病毒质粒；(4)、获得基因组结构均一的重组腺病毒，根据需要制备成所需剂型的疫苗。本发明能够避免猪伪狂犬病病毒和猪瘟病毒同时作为抗原免疫时发生的免疫抑制现象，获得了免疫受体能够在免疫7天内产生猪瘟抗体的意想不到的效果。
