本发明公开了一种连接接口及传输线,连接接口包含有一第一组接脚,包含有对应于一第三代通用串行总线(Universal Serial Bus 3.0,USB 3.0)规格的多个接脚;以及一第二组接脚,包含有对应于一第二代通用串行总线(Universal Serial Bus 2.0,USB 2.0)规格的多个接脚;其中,该第一组接脚及该第二组接脚呈相互并排排列,且该第二组接脚依照该第二代通用串行总线规格的一前端面板(front panel header)脚位定义方式而排列。本发明的连接接口,可延用一现有的第二代通用串行总线传输线,以达到第二代通用串行总线传输功能,并不需重新制定一新规格的传输线。因此,材料成本及生产成本可有效降低,也可降低各家系统厂组装系统时造成混淆的可能。