本发明公开了一种蛇胆汁的鉴别方法,其步骤如下:a)提取待测蛇胆汁的DNA,并以该DNA为模板分别采用第一、第二及第三对引物进行PCR扩增,得三组扩增产物,第一对引物YanJing-F和YanJing-R、第二对引物YouShe-F和YouShe-R、第三对引物KuiShe-F、KuiShe-R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3-8所示;b)将三组扩增产物分别进行凝胶电泳,当任意一组扩增产物的电泳图在300-400bp处有一条DNA条带,则该蛇胆为正品,反之则为伪品。本发明公开的方法操作简捷、适用性强,且鉴定结果准确可靠。