本发明提供鉴定烟草植物的方法、生产烟草植物细胞的方法、植物细胞和降低了生物碱的产品。鉴定烟草植物的方法中,所述烟草植物包括在尼古丁生物合成途径基因中的突变,所述突变导致植物中的生物碱水平的降低,所述方法包括(a)从一种或多种烟草植物获得核酸样品;(b)使所述样品接触核酸引物,所述核酸引物包括SEQ ID NO3或其互补序列的至少15个连续的核苷酸;和(c)鉴定具有与SEQ ID NO3相比至少约90%同一性的核酸序列的样品,其中所述尼古丁生物合成途径基因是NBB1。
本发明提供了降低植物中生物碱的方法、遗传工程植物细胞以及降低了生物碱的产品。所述降低植物中生物碱的方法包括相对于非转化对照植物减量调节尼古丁生物合成途径基因的表达,其中所述尼古丁生物合成途径基因是A622基因,所述A622基因包括选自由如下所组成的组的核苷酸序列(a)SEQ ID NO1所示的核苷酸序列;(b)编码具有SEQ ID NO2所示氨基酸序列的多肽的核苷酸序列;和(c)编码多肽的核苷酸序列,所述多肽与具有SEQ ID NO2所示氨基酸序列并且具有A622表达的多肽相比具有一个或多个保守氨基酸置换。
本发明提供了一种引物或探针对,所述引物或探针对能扩增或检测与SEQID NO:3具有至少80%同一性的核酸分子。本发明还提供了一种用于鉴定含有NBB1突变等位基因的烟草植物的方法,其包括(a)从一种或多种烟草植物中获得核酸样品;以及(b)将所述样品与核酸引物相接触,所述核酸引物包括SEQ ID NO:3的至少15个连续的核苷酸或其互补序列;以及(c)鉴定具有与SEQ ID NO:3至少80%同一性的核酸序列的样品。本发明还提供了使用所述方法得到的烟草植物、其鉴定、改变方法,其细胞、其产品及有关多核苷酸。