本发明公开了一种等温介导扩增鉴定鲟鱼性别的引物组及其应用,所述引物组包括以下引物序列:LF:RCACAGARGCACGACTRT(SEQ ID NO:1)、LB:ADG CARGTCGTATRTCTCRGT(SEQ ID NO:2)、F3:BCCSAGAATTTCWRCTTGA(SEQ ID NO:3)、B3:AGGWCTGTCTGTRTCDCABAT(SEQ ID NO:4)、FIP:TRATARAATCACAC ATWGGGGCATTACTTTGTGTCATCTACACDWCC(SEQ ID NO:5)、BIP:CTGCBRGGAAGCA AADAGCACACATRCTGTTTATGCGAWT(SEQ ID NO:6);本发明通过对鲟鱼性别差异区域设计等温扩增引物组,可摆脱常规PCR方法对PCR仪器的依赖,只需要水浴锅、金属浴等温控装置即可完成对样本特异性区域的扩增,达到鉴别区分的需求。