本发明属于生物信息技术领域,公开了一种叶绿体基因组高变位点及其检测方法与应用,所述叶绿体基因组高变位点由一对引物序列确定,所述引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2;所述叶绿体基因组高变位点的检测方法包括:合成引物;提取待分析柑桔类材料的基因组总DNA,PCR扩增获得高变位点序列;将扩增产物进行电泳检测,回收目的DNA片段;将目的DNA片段加尾,获得重组T载体;将重组T载体转化大肠杆菌感受态细胞;蓝白斑筛选,挑取白色单菌落恒温培养,菌液测序。本发明通过对该序列进行基因组扩增、克隆、测序和比对分析,可以较好地判断不同柑桔果树的胞质来源,实现对柑桔类果树的类群区分。
本发明属于基因工程技术领域,公开了一种短DNA序列在柑桔类群和柑桔种苗鉴定的应用,鉴定短DNA序列的引物序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,以及由该引物界定的序列在主要柑桔类群的代表序列及其SNP、SSR和Indel组合特征表。本发明通过给定引物扩增柑桔基因组,得到目标短序列并进行克隆测序分析;根据片段SSR、Indel和/或SNP变异特性或变化组合,可对柑桔的杂合状态、柑桔类群和柑桔种苗进行鉴定。本发明通过对一段特定短序列的克隆测序,比较测序序列的特征,完成柑桔类果树不同材料的分析鉴定。通过对序列进行基因组扩增、克隆、测序和与组合特征表比对分析,对柑桔类果树进行类群区分。