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[发明专利]一种鸭大肠杆菌的高密度发酵方法-CN201810782440.5有效
发明人： 龚凤平;袁建丰;马海彬;罗梦萍 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司
申请日： 2018-07-17 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸭大肠杆菌的高密度发酵方法，以高密度发酵培养基为基础，使用发酵罐进行鸭大肠杆菌高密度发酵。发酵过程中，设定pH7.0～7.5、温度36.5～37.5℃、转速90～420rpm、空气通气量1.2～5.2L/min。接种前流加适量消泡剂，接种后，待细菌OD600nm达到4.0～6.0时，以流速10～25mL/h/L流加45～55(w/v)％葡萄糖溶液，流加葡萄糖的量为每升高密度发酵培养基流加葡萄糖50～100g。本发明所述的鸭大肠杆菌高密度发酵方法，基于高密度发酵培养基，其营养丰富，通过流加葡萄糖，可实现鸭大肠杆菌高密度发酵，可用于大规模发酵生产鸭大肠杆菌疫苗。
一种大肠杆菌高密度发酵方法

[发明专利]一种鉴定新型鹅细小病毒的方法-CN201910194623.X在审
发明人：卞国志;马海彬;袁建丰;龚凤平;罗梦萍 -专利权人：华南农业大学;广东海大畜牧兽医研究院有限公司
申请日： 2019-03-14 - 公布日： 2019-07-12 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种鉴定新型鹅细小病毒的方法，本发明荧光定量PCR检测方法灵敏度高，可检测到10拷贝数的新型鹅细小病毒目的基因，普通PCR只能检测到10⁴拷贝数，灵敏度高1000倍；特异性强，根据经典鹅细小病毒和番鸭细小病毒与新型鹅细小病毒基因差异性区域设计合成一对特异性引物，能特异性扩增出新型鹅细小病毒基因片段；重复性好，可以准确、快速地进行分析，有利于在临床实践中推广应用。
鹅细小病毒拷贝数灵敏度种鉴定荧光定量PCR检测番鸭细小病毒特异性扩增特异性引物基因差异基因片段目的基因区域设计特异性强可检测合成检测分析

[发明专利]鸭大肠杆菌高密度发酵培养基及其制备方法-CN201810782235.9在审
发明人：袁建丰;龚凤平;马海彬;罗梦萍 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司
申请日： 2018-07-17 - 公布日： 2018-12-25 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸭大肠杆菌高密度发酵培养基及其制备方法，该培养基配方为每升水中含有酵母浸出物30.0～40.0g，胰蛋白胨5.0～15.0g，大豆蛋白胨5.0～15.0g，水解乳蛋白5.0～10.0g，酪蛋白胨5.0～10.0g，胃蛋白胨4.0～7.0g，麦芽浸粉1.0～3.0g，磷酸氢二钾2.0～5.0g，甘油1.0～3.0mL，铁盐2.0～10.0mg，锰盐2.0～10.0mg，铝盐2.0～10.0mg。本发明所述培养基价格低廉，配制方法简单，可实现鸭大肠杆菌高密度发酵，可用于大规模发酵生产鸭大肠杆菌疫苗。
大肠杆菌高密度发酵培养基制备麦芽大肠杆菌疫苗大豆蛋白胨大规模发酵酵母浸出物磷酸氢二钾培养基配方水解乳蛋白酪蛋白胨胰蛋白胨甘油蛋白胨可用铝盐锰盐水中铁盐配制生产

[发明专利]一种鸭坦布苏病毒的半灌流式培养方法-CN201610395175.6有效
发明人：王伟;冯晓声;罗梦萍;王贵平;龚凤平 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司
申请日： 2016-06-03 - 公布日： 2018-05-18 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开一种鸭坦布苏病毒的半灌流式培养方法；包括步骤：1)采用细胞培养装置进行病毒增殖：将装有载体的细胞培养装置进行高压灭菌，加入培养液；无菌接入非洲绿猴肾细胞；2)更换培养液：每天测定培养液中葡萄糖含量以及pH值，进行培养液更换；3)病毒接种：接入含鸭坦布苏病毒的尿囊液，进行病毒扩增培养；4)补充培养液：收集粗制病毒液，然后补入等量的新鲜培养液继续培养；5)保存：将步骤4)收获的粗制病毒液于‑100～‑20℃，反复冻融1～5次，冻融后离心取细胞碎片、过滤，得到病毒液，‑20℃保存；本发明提高病毒生产效率，每培养一批细胞可以连续收获多次粗制病毒液。
一种鸭坦布苏病毒灌流培养方法

[发明专利]马红球菌致病基因VapA重组蛋白的应用-CN201510273207.0有效
发明人：孙凌霜;龚凤平;贾坤;李守军 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2015-05-26 - 公布日： 2017-12-26 - 主分类号： A61K39/02 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体公开了马红球菌致病基因VapA重组蛋白在制备治疗或检测马红球菌病的制剂中的应用，其特征在于，所述马红球菌致病基因VapA重组蛋白为带MBP标签的MBP‑VapA，其氨基酸序列如SEQ ID NO1所示，获得的重组蛋白几乎全部以可溶表达的形式存在。该重组蛋白具有良好的免疫原性，适于临床治疗用高免血清抗体、疫苗、临床诊断试剂等生物技术产品的开发。
球菌致病基因 vapa 重组蛋白应用

[发明专利]一种可溶性表达马红球菌致病基因VapA蛋白的方法-CN201510273219.3有效
发明人：孙凌霜;龚凤平;李守军 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2015-05-26 - 公布日： 2015-08-26 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体公开了一种可溶性表达马红球菌致病基因VapA蛋白的方法，是将VapA基因克隆到PMAL-C5x载体上，构建表达载体PMAL-VapA，并将PMAL-VapA转化至原核表达菌，通过IPTG在20℃下诱导获得；以上述方法获得的重组蛋白几乎全部以可溶表达的形式存在。将该重组蛋白纯化后，浓度可达2mg/mL，该重组蛋白具有良好的免疫原性，更适于临床治疗用高免血清抗体和疫苗的制备、临床诊断试剂的开发和应用以及马红球菌致病机理的研究。
一种可溶性表达球菌致病基因 vapa 蛋白方法