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[发明专利]一种从全血快速精准分离目的细胞的方法-CN202310859425.7在审
发明人：叶永清;黄能平;王力;左鹏举 -专利权人：北京三一造血技术有限公司
申请日： 2023-07-13 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种从全血快速精准分离目的细胞的方法，主要涉及生物物质分离纯化领域；包括步骤：S1、制备用于连接红细胞和非目的细胞的多价特异性抗体；S2、将多价特异性抗体与新鲜全血混合均匀后静置；S3、将淋巴细胞分离液与步骤S2中混匀后的全血加入快速单个核细胞分离管中，进行离心处理；S4、倒出上层白膜层，洗涤后即获得目的细胞；本发明能从全血中快速分离目的细胞，操作简单，采用无接触分选，得到的目的细胞保持原始状态，可以直接用于下游应用和分析。
一种快速精准分离目的细胞方法

[实用新型]一种高纯度外泌体分离装置-CN202222715359.X有效
发明人：叶永清;黄能平;王力;左鹏举;仇宇光 -专利权人：北京三一造血技术有限公司
申请日： 2022-10-16 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12M1/24 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种高纯度外泌体分离装置，包括装置I以及装置II，所述装置I依靠孔径大小分选颗粒，所述装置II为温敏型外泌体分离装置，所述装置I孔径大小为150nm，所述装置II温敏型细胞分离管主体的内壁设置有S型玻璃微管。管内壁经硅烷偶联剂APTES改性后通过层层自组装技术使管道内部均匀涂抹上一层明胶，且明胶表面使用链霉亲和素改性，同时使用生物素化抗体连接明胶表面的链霉亲和素，有利于对外泌体精确分选，明胶在37°C温度之下从固态变成液态，从而可使连接在明胶表面的外泌体完整解离，后续通过液体对管道进行冲洗，脱落的外泌体就会从右边出口流出被收集到，通过使用物理尺寸及外泌体表面标记物相结合的分离方法能够获得高纯度无损伤的完整外泌体。
一种高纯度外分离装置

[发明专利]一种体外快速扩增红细胞技术-CN202210615069.X在审
发明人：叶永清;黄能平 -专利权人：厦门三一造血技术有限公司
申请日： 2022-06-01 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：一种体外快速扩增红细胞技术，属于再生医学领域，包括使用低浓度的IL‑β、PEG2以及TGF‑β因子组合（IPT），IL‑β、PEG2以及TGF‑β使用浓度分别为10ng/ml、5ng/ml以及30pg/ml，使用该因子组合可以增加早期红系祖细胞的增殖，加速红细胞分化和脱核，可以将传统21天成熟红细胞培养时间缩短至14天左右，为工业化生成红细胞探索一条可能的道路。
一种体外快速扩增红细胞技术

[发明专利]一种适合血液细胞生长的培养基配方-CN202210616919.8在审
发明人： 黄能平;叶永清;杨丽秋;伊莉莉 -专利权人：厦门三一造血技术有限公司
申请日： 2022-06-01 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明公开了一种血液细胞无血清培养基及其配置方法,包括基础培养基组份I以及血液细胞特异性培养组份II，组份I钙离子浓度为3mM，比传统培养基成份钙离子增加8倍，成份Ⅱ含18种化合物。本发明使：1）组份I和组份II配置的完全培养基成份更加接近于人体正常生理状态，有利于T细胞以及NK细胞的激活,促进CD25、CD137、CD69以及CD107a等表面标记物表达。2）促进细胞增殖，T细胞以及NK细胞增殖数量比传统培养方法增加30%以上：3)促进抗原特异性细胞的生成，提升培养T及NK细胞对肿瘤细胞特异性杀伤能力；4）不使用动物血清能够降低异源风险以及不确定成分对细胞培养的结果造成的影响。
一种适合血液细胞生长培养基配方

[发明专利]一种树突状细胞体外高效扩增体系-CN202210614803.0在审
发明人：叶永清;黄能平;杨丽秋 -专利权人：厦门三一造血技术有限公司
申请日： 2022-06-01 - 公布日： 2022-08-23 - 主分类号： C12N5/0784 文献下载
摘要：本发明属于细胞培养技术领域，尤其为一种树突状细胞体外高效扩增体系，其特征在于使用特定因子组合I从外周血单个核细胞中直接扩增DC前体细胞，再使用特定因子组合II从DC前体细胞中生成大量功能性DC细胞。特定因子组合I包括以IMDM作为基础培养基加入5 ng/mL SCF、20nM hydrocortisone、10ng/mLIL‑6、5ng/mL Flt‑3L、5ng/mLIL‑1β、20ng/mL GM‑CSF以及帕洛沙姆10μg/ml。特定因子组合II包括以F12/DMEM作为基础培养基加入0.5μg/mL PGE2以及20ng/mL TNF‑α。本发明申请能够从1ml全血中经过体外培养获得2~5x10^7 DC细胞，为解决临床治疗使用DC细胞数量不足提供一种可行的解决方案。
一种树突细胞体外高效扩增体系

[发明专利]一种多种抗原特异性T细胞体外高效扩增方法-CN202210615659.2在审
发明人：叶永清;黄能平;王力;左鹏举;伊莉莉;仇宇光 -专利权人：厦门三一造血技术有限公司
申请日： 2022-06-01 - 公布日： 2022-08-23 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：一种多种抗原特异性T细胞体外高效扩增方法，属于细胞基因治疗领域，其特征在于使用IL‑1β、IL‑4、IL‑7、IL‑15、1L‑18、IL‑21多种细胞因子组合以及胎盘混合抗原多肽刺激可以在体外获得多于15种混合CD8+以及CD4+特异性T细胞，其中获得CD8+T细胞比例25‑60%，获得CD4+T比例在32‑55%，使用该种方法获得的混合肿瘤抗原特异性T细胞为提高肿瘤治疗的效果提供一个可能的路径。
一种多种抗原特异性细胞体外高效扩增方法

[发明专利]一种以工程化红细胞作为滋养层细胞体外高效扩增NK细胞的方法-CN202210576258.0在审
发明人： 黄能平;叶永清;杨丽秋 -专利权人：厦门三一造血技术有限公司
申请日： 2022-05-25 - 公布日： 2022-08-16 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：一种以工程化红细胞作为滋养层细胞体外高效扩增NK细胞的方法，属于细胞基因治疗领域，包括使用低浓度戊二醛醛化红细胞表面蛋白，并在红细胞表面标记多种不同蛋白组合，包括IL‑15,4‑1BB，CD335单抗以及CD2单抗等，使用工程化红细胞作为滋养层细胞在体外反复刺激PBMC可以产生大量NK细胞，以工程化红细胞作为滋养层细胞体外高效扩增NK细胞具有如下优点：一、避免了K562等肿瘤细胞系的使用能够确保NK细胞制备过程更加安全，二、使用工程化红细胞反复刺激能够在体外获得大量高杀伤活性NK细胞，获得NK细胞数量比使用因子法能够增加30%以上。此种制备安全足量的NK细胞方法能够更加符合临床使用需求。
一种工程红细胞作为滋养细胞体外高效扩增 nk 方法

[实用新型]一种用于细胞分离的自解离微流控制装置-CN202022899720.X有效
发明人：叶永清;黄能平;伊莉莉 -专利权人：福建三一造血技术有限公司
申请日： 2020-12-04 - 公布日： 2021-12-07 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用公开了一种用于细胞分离的自解离微流控制装置，包括微流控主板和U型管路，所述微流控主板的内部设置有U型管路，且U型管路内壁通过氯化钙溶液黏附有海藻酸钠薄层，并且海藻酸钠薄层的厚度为1μm，同时海藻酸钠薄层通过EDC/NHS连接有链霉亲和素，所述链霉亲和素的一侧连接有生物素化抗体。该用于细胞分离的自解离微流控制装置，使用钙离子溶液润洗微流控管道后，将海藻酸钠溶液通过管道，使之在微流控管道表面形成海藻酸钠薄层，使用海藻酸钠分离细胞后，将EDTA溶液润洗微流控管道，此时海藻酸钠薄层成为液态，黏附在海藻酸钠上面的细胞也解离，这种温和的解离方式，不会对细胞造成损害，保持细胞活性利用后续的细胞应用。
一种用于细胞分离解离控制装置

[实用新型]一种高密度细胞培养装置-CN202022901773.0有效
发明人： 黄能平;叶永清;伊莉莉 -专利权人：福建三一造血技术有限公司
申请日： 2020-12-04 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种高密度细胞培养装置，包括培养主体和瓶盖，所述培养主体的右侧顶端位置设置有瓶盖，且培养主体的底部两侧位置均设置有支座。该高密度细胞培养装置，瓶底采用FEP膜，其具有防水透气的功能，增加了培养瓶内外环境的气体交换，加快细胞生长，FEP膜可加大培养瓶内外环境的气体交换，更大的提高的细胞密度，缩短了培养时间，支座的内侧截面呈“L”形结构设置，通过支座的设置不仅可以完成培养主体多个之间的重叠放置放置工作，同时由于支座的底部与瓶底之间存在间隙，保证在进行堆叠放置的时候，也不会影响FEP膜的正常透气工作，增加了细胞培养箱的使用率。
一种高密度细胞培养装置

[实用新型]一种细胞自动分离仪器-CN202022902407.7有效
发明人：叶永清;黄能平 -专利权人：福建三一造血技术有限公司
申请日： 2020-12-04 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12M1/42 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种细胞自动分离仪器，包括离心管槽、温控和离心速率控制装置，所述离心管槽内部设置有磁力装置，且离心管槽顶面设置有血液进样口，所述血液进样口一侧设置有分离液进样口，且分离液进样口一侧设置有试剂进样口。该细胞自动分离仪器，本细胞自动分离仪器含有自动进样装置，可以先将外周血中单个核细胞就行自动分离，然后将分离后的单个核细胞和从分离液进样口泵入的标记抗体的磁性海藻酸钠微球在离心管槽内部的细胞分离管腔内混合，通过磁力装置作用与抗体标记磁性海藻酸钠微球结合的目的细胞可以吸附在管腔内，废液排除后，加入含有EDTA的溶液，磁性海藻酸钠微球能够解离从而从成品出口处获得完整活性高的细胞。
一种细胞自动分离仪器

[实用新型]一种细胞培养仪器-CN202022903112.1有效
发明人：叶永清;黄能平 -专利权人：福建三一造血技术有限公司
申请日： 2020-12-04 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12M3/06 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种细胞培养仪器及使用方法，包括仪器主体、湿度传感器、温度传感器和CO2传感器，所述仪器主体的内部固定连接有离心单元，且离心单元的内部连接有离心管槽，并且离心单元的内部连接有连接泵，而且离心管槽的一侧与第一输送管相互连接，所述第一输送管的另一端与细胞培养单元相互连接，且细胞培养单元的底部固定安装有湿度传感器和温度传感器，并且细胞培养单元的上端固定安装有CO2传感器，所述细胞培养单元的内部连接有取样口和进液口。该细胞培养仪器及使用方法在进行使用的过程中，在进行使用的过程中，完全自动化封闭的培养仪器大大降低了污染的风险，简化了操作流程，降低了不同批次培养终产品的批间差。
一种细胞培养仪器

[实用新型]一种细胞分离筛子-CN202022903136.7有效
发明人：叶永清;黄能平 -专利权人：福建三一造血技术有限公司
申请日： 2020-12-04 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12M1/12 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种细胞分离筛子，包括第一圆管、第二圆管和第三圆管，所述第一圆管底部连接安装有第二圆管，且第二圆管底部连接安装有第三圆管，所述第一圆管内部底端固定安装有第一过滤网，所述第二圆管内部底端固定安装有第二过滤网，所述第三圆管内部底端固定安装有第三过滤网，所述第一过滤网、第二过滤网和第三过滤网上都开设有通孔。该一种细胞分离筛子通过设置三个可套接在一起的圆管，每个圆管内部设置有滤网，并且滤网上都开设有通孔，通孔从下至上依次变小的设置，使得该细胞分离筛子可以对细胞进行多层分离，方便对不同直径大小的细胞进行收集，便于下游使用。
一种细胞分离筛子

[实用新型]一种细胞分离自解离装置-CN202022903367.8有效
发明人：叶永清;黄能平 -专利权人：福建三一造血技术有限公司
申请日： 2020-12-04 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种细胞分离自解离装置，包括样品室、蠕动泵和分离柱，所述样品室一侧连接安装有蠕动泵，且蠕动泵另一端连接安装有分离柱，并且蠕动泵位于分离柱上端，所述分离柱底部连接安装有接收腔，且接收腔内部设置有接收屉，所述分离柱内部设置有分离微球。该一种细胞分离自解离装置通过在分离微球表面使用脱硫生物素改性后连接链霉亲和素，使得与生物素化抗体标记的细胞流经分离柱时会与分离微球表面的链霉亲和素结合，在生物素竞争性结合链霉亲和素时，便可以将细胞洗脱下来，并通过竖直设置的分离柱和分离柱内部的分离微球，对细胞进行洗脱后，可以对分离的细胞进行收集，便于下游后续应用。
一种细胞分离解离装置

[实用新型]一种树突状细胞密闭培养系统-CN202022903638.X有效
发明人：叶永清;黄能平 -专利权人：福建三一造血技术有限公司
申请日： 2020-12-04 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12M3/04 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种树突状细胞密闭培养系统，包括细胞培养瓶主体和无菌滤器，所述细胞培养瓶主体的右端连接有无菌滤器，且细胞培养瓶主体的右端连接有导管，并且导管的另一端连接有进样口，而且进样口的一侧固定连接有分离管，所述导管的右侧分别连接有培养基袋一、培养基袋二、洗液袋和废液收集袋。该系统包含细胞培养瓶主体、无菌滤器、培养基袋一、洗液袋、废液收集袋和单个核细胞分离装置这6个主体部分，细胞培养瓶主体用于培养DC细胞，单个核细胞分离装置用于分离出单个核细胞，培养基袋一用于提供培养基和细胞成品收集，洗液袋用于洗去未贴壁细胞，废液收集袋用于收集未贴壁细胞，无菌滤器用于气体交换。
一种树突细胞密闭培养系统

[实用新型]一种细胞补液及取液支架-CN202022917689.8有效
发明人： 黄能平;叶永清;伊莉莉 -专利权人：厦门三一造血技术有限公司
申请日： 2020-12-08 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种细胞补液及取液支架，包括细胞补液及取液支架组件，所述细胞补液及取液支架组件一侧板体的两端均固定设置有补液注射器外壳夹持固定组件，本实用新型细胞补液及取液支架组件支撑底座板的上方被主支撑竖板分隔成细胞培养袋取液空间和细胞培养袋补液空间两个空间，补液时，通过顶紧弹簧的顶紧，使得细胞补液注射器外壳紧紧夹紧固定在第一补液注射器外壳夹持弧板和第二补液注射器外壳夹持弧板之间，取液时，将细胞培养袋本身的袋孔挂在细胞培养袋取液空间侧的细胞培养袋取液挂钩上，完成取液，本实用新型将取液架装置与补液架装置合并在一起，一个架体装置就可以完成补液和取液，节约实验台空间。
一种细胞补液支架

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