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[实用新型]全自动化质粒裂解系统-CN202123297948.2有效
发明人：张海峰;陈凯;隋礼丽;孔令洁 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-12-24 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C12M1/36 文献下载
摘要：本实用新型提供一种全自动化质粒裂解系统，包括中控电脑、第一蠕动泵、第二蠕动泵、第一电子天平、第二电子天平、混合器和搅拌罐，中控电脑通过线路分别与第一蠕动泵、第二蠕动泵、第一电子天平和第二电子天平连接；第一天平上放置有内装样品溶液S1的第一容器，第二天平上放置有内装裂解碱液S2的第二容器，第一蠕动泵通过管路连接至第一容器内，第二蠕动泵通过管路连接至第二容器内，第一蠕动泵和第二蠕动泵的输出端通过Y形管路连接至混合器，混合器的输出端通过中和管路连接至搅拌罐。通过中控电脑、蠕动泵和电子天平的配合能够对裂解过程进行精准控制，可以方便的调整裂解比例；通过混合器能够保证溶液混合均匀，且容易操作。
自动化质粒裂解系统

[发明专利]细胞建库过程中细胞分装的方法-CN202110958012.5有效
发明人：胡迪超;隋礼丽;孔令洁 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-08-20 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： B65B3/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种细胞建库过程中细胞分装的方法，其包括以下步骤：组装分液器灭菌消毒组件；分液器灭菌消毒组件包装灭菌密封袋并进行高压灭菌；分液器灭菌消毒组件和带包装袋的细胞培养摇瓶进行紫外照射消毒；将细胞扩增并离心收集，使用培养基将细胞悬液调节至所需的密度；在生物安全柜中，拆除分液器灭菌消毒组件和细胞培养摇瓶的包装，将细胞悬液转移至细胞培养摇瓶中，然后将分液器取下并将分液器与细胞培养摇瓶连接，组成细胞悬液分装系统；打开分液器的控制阀，设置分装体积，将细胞悬液分装于细胞冻存管中，盖上管盖，于‑80℃预冻存24 h，次日转入液氮中长期储存。本发明能用极低的成本实现细胞的分装，使分装细胞满足均一性和一致性。
细胞过程分装方法

[实用新型]多级过滤器密封浓缩系统-CN202123316056.2有效
发明人：徐燕;郭伟;祝岩;徐裕克;胡爽;张志成;隋礼丽;孔令洁 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-12-27 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： B01D36/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种多级过滤器密封浓缩系统，其特征在于：包括依次设置的样品袋、多级滤器、浓缩样品袋、中空纤维柱和废液袋，所述样品袋、多级滤器、浓缩样品袋和中空纤维柱之间通过连接管无菌焊接连接，所述中空纤维柱的侧壁上设有透过端，所述透过端与废液袋连接，中空纤维柱的上端具有回流端，所述回流端通过回流管联通浓缩样品袋，所述浓缩样品袋与中空纤维柱的连接管上设有蠕动泵，所述样品袋上连接有压缩气体进气管。本实用新型解决了病毒纯化终端过滤的回收率低的问题，能提供无菌的浓缩环境，有效防止环境、人为操作对产品的影响。
多级过滤器密封浓缩系统

[实用新型]一种3D洗滤系统-CN202121963110.X有效
发明人：徐燕;郭伟;祝岩;徐裕克;隋礼丽;孔令洁 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-08-20 - 公布日： 2022-04-19 - 主分类号： B01D29/27 文献下载
摘要：本实用新型提供一种3D洗滤系统，包括用于容纳病毒液和缓冲液的3D洗滤袋，所述3D洗滤袋外部设有支撑夹套，所述3D洗滤袋的顶部设有补液管路和空气滤器，所述3D洗滤袋的底部设有回流管路和进液管路，且3D洗滤袋的底部还设有取样接口，所述取样接口上连接无菌取样器，所述3D洗滤袋的内侧底部设有搅拌桨。该系统糅合了二维储液袋和洗滤瓶的优势，设计了3D洗滤袋，外加透明的外部支撑夹套，洗滤袋上端配备补液管路和空气滤器，下端配备回流管路、进液管路和无菌取样器。此外添加了底部搅拌桨，通过系统的电池提供电源，更充分混匀料液，提高溶液置换效率。
一种系统

[发明专利]一种HEK293TS悬浮细胞的慢病毒滴度检测方法-CN202210047969.9在审
发明人：代真真;刘启慧;胡迪超;隋礼丽;钱浩 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2022-01-17 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种HEK293TS悬浮细胞的慢病毒滴度检测方法，其包括以下步骤：调整HEK293TS悬浮细胞密度并混匀；取适量HEK293TS悬浮细胞铺于24孔板中；将慢病毒液预稀释若干倍，在24孔板的每孔加入适量的预稀释病毒液，再补加适量的病毒稀释液，使各个孔内病毒液的体积相同；使用CO2摇床对HEK293TS细胞进行培养，分别培养0h、24h、48h后，分别检测0h、24h后的活细胞密度和细胞活率，并流式检测培养48h后的病毒的滴度。本发明的检测方法，操作简单，检测周期短，检测通量高，且能避免HEK293T贴壁细胞培养存在的血清批间差异问题；本发明的病毒稀释液不会造成HEK293TS悬浮细胞的细胞活率和活细胞密度的下降；本发明采用CO2摇床对病毒进行培养，提高了细胞活率、活细胞密度和FACS感染滴度。
一种 hek293ts 悬浮细胞病毒检测方法

[发明专利]一种病毒纯化高效保护试剂及其应用-CN202210046400.0在审
发明人：张海峰;王雷;刘佳博;隋礼丽;钱浩 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2022-01-17 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C12N7/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种病毒纯化高效保护试剂及其应用，病毒纯化高效保护试剂包括的组分及含量为：0.5‑1M蔗糖、20‑30g/L精氨酸、15‑20g/L甘氨酸、15‑20g/L甘露醇、35‑40g/L海藻糖、0.4‑0.5M MgCl2、0.5M Tris‑HCl，其余为超纯水，pH为7.5。本发明的病毒纯化高效保护试剂，在病毒层析纯化的过程中，在平衡阶段、上样阶段和洗脱阶段，通过添加本发明的病毒纯化高效保护试剂，能对AAV病毒或其他病毒进行保护，避免AAV或其他病毒的蛋白外壳在层析纯化中因条件发生剧烈变化导致蛋白构象改变而影响AAV或其它类病毒的活性和产量。
一种病毒纯化高效保护试剂及其应用

[实用新型]旋转式气相液氮罐托盘-CN202122458710.7有效
发明人：陈令跃;陈影;陈洁妤;李妍妍;陈慧;隋礼丽;孔令洁 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-10-12 - 公布日： 2022-04-05 - 主分类号： B65D25/02 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种旋转式气相液氮罐托盘，包括旋转底盘、支架框、顶面悬挂栏和冻存架，所述旋转底盘设置在支架框底部，顶面悬挂栏设置在支架框的顶部，冻存架能够穿过顶面悬挂栏插入支架框内，插入后冻存架顶部能悬吊在顶面悬挂栏上，冻存架的高度不大于支架框内部的高度，旋转底盘能够带动支架框整体旋转移动；本实用新型气相液氮罐托盘能够固定冻存架，也能在罐体内局部旋转，配合罐体使用，便于准确的拿取冻存架。
旋转式气相液氮托盘

[发明专利]一种从动物组织中提取AAV DNA的方法-CN202111489560.4在审
发明人：大明;蔡中山;孔令洁;隋礼丽 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-12-08 - 公布日： 2022-03-29 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种从动物组织中提取AAV DNA的方法，其步骤包括：配制所需的溶液1‑6，获取组织样本并匀浆；取适量样本加入容器管并添加适量的溶液1；先后加入适量的溶液2和溶液6，振荡孵育并使样本细胞裂解完成；冷却至室温，向其中添加溶液5，孵育后加入适量的溶液3，混合并降温；离心然后过滤；向上清液中加入1倍体积的乙醇；溶液加载到回收柱中，用溶液4洗涤回收柱若干次；用水对回收柱洗脱若干次，取适量洗脱溶液转移至新容器管中，涡旋并剪切洗脱溶液中的染色体DNA；添加适量的10X的核酸外切酶V缓冲液；添加适量的ATP溶液；添加适量的核酸外切酶V，去除宿主DNA和非附加型病毒DNA，添加适量的溶液5，孵育过夜；使用DNA纯化试剂盒进行纯化等步骤。
一种动物组织提取 aav dna 方法

[实用新型]多规格EP管架-CN202122142010.7有效
发明人：陈影;陈慧;隋礼丽;孔令洁 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-09-06 - 公布日： 2022-03-18 - 主分类号： B65D61/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种多规格EP管架，包括架体，所述架体包括顶部和前端敞开的框架以及均匀分布在框架底面上的若干分隔板，所述框架的两侧壁上部和分隔板的两侧上部均固定有安装梁，相对设置的两个安装梁上可移除设有一支撑架，所述支撑架上设有包括0.6ml、1.5～2ml的EP管孔。本实用新型设计合理，操作方便，易于掌握，可重复利用，可根据实验需求调整EP管孔规格合数量的支撑架，更加灵活的运用于实际实验需求。
规格 ep

[实用新型]固定流式细胞仪EP管的上样支架-CN202121842572.6有效
发明人：陈影;陈慧;隋礼丽;孔令洁 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-08-09 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： G01N15/14 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种固定流式细胞仪EP管的上样支架，包括支架本体和若干EP管本体，所述支架本体的两侧具有向上翻转15～25°的折板，所述折板上均匀开设有若干供EP管本体插入的通孔，所述通孔内壁上固定有摩擦件；所述EP管本体包括一体成型的管体和管盖，所述管盖包括盖板、盖合件和连接臂，所述连接臂固定连接在管体上端侧壁，所述盖合件与管体上口相配合，所述管盖上还设有使连接臂弯折后紧密贴合的扣紧结构。本实用新型向上翻转15～25°的折板，一定程度上阻止EP管脱离上样支架；摩擦件进一步阻止EP管脱离；扣紧结构保证连接臂不容易受外力而使管盖打开；提高使用安全性。
固定细胞 ep 支架

[发明专利]一种慢病毒溶解缓冲液及其应用-CN202111608966.X在审
发明人：胡迪超;皮川真;隋礼丽;孔令洁 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-12-27 - 公布日： 2022-01-28 - 主分类号： C12N7/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种慢病毒溶解缓冲液及其应用，其包括3‑10mM的Tris、15‑35mM的脯氨酸、1‑5mM的MgCl2、5‑20%的乳糖、0.005%‑0.02%的Tween80，其余为水，上述的百分比均为质量百分比，慢病毒溶解缓冲液的pH为7‑9。本发明的慢病毒溶解缓冲液的组分都是药用辅料，能避免对慢病毒活性的影响，在本发明的慢病毒缓冲液中添加脯氨酸能稳定病毒结构和增强病毒活性；Tween80能够防止蛋白或病毒聚集；MgCl2具有维持蛋白或病毒活性的作用，通过上述的配方中的几种组分的组合作用，能全面提升慢病毒纯化时的活性和回收率，并提高慢病毒的转导效率以及转导的CAR的阳性率。
一种病毒溶解缓冲液及其应用

[发明专利]基于HEK293T克隆筛选的用于高滴度慢病毒生产的悬浮驯化方法-CN202111258035.1在审
发明人：胡迪超;马红;隋礼丽;孔令洁 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-10-27 - 公布日： 2022-01-28 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于HEK293T克隆筛选的用于高滴度慢病毒生产的悬浮驯化方法，包括以下步骤：S1适合慢病毒包装的HEK293T贴壁细胞的克隆筛选，筛选出侵染效率较高的前若干个克隆细胞，进行扩大培养并建库，S2对筛选的HEK293T贴壁细胞进行快速悬浮驯化，得到细胞活率93～98%，且细胞分散性较好、无明显聚集的悬浮驯化成功的HEK293T细胞；S3悬浮HEK293T高滴度慢病毒包装克隆细胞的筛选，筛选侵染效率高的病毒上清，所对应的克隆细胞即为慢病毒高产的悬浮HEK293T细胞克隆。本发明提供的基于HEK293T克隆筛选的用于高滴度慢病毒生产的悬浮驯化方法，能快速获得生产高滴度慢病毒的悬浮HEK293T细胞克隆，所获得的悬浮HEK293T细胞克隆能无血清悬浮培养和病毒包装，病毒滴度高，纯化效率高，易于放大生产。
基于 hek293t 克隆筛选用于高滴度慢病毒生产悬浮驯化方法

[发明专利]三通道双淬灭探针检测可复制性慢病毒的试剂及其检测方法-CN202110788280.7在审
发明人：陈剑峰;陈慧;沈琴文;王涵宇;孔令洁;隋礼丽 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-07-13 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种三通道双淬灭探针检测可复制性慢病毒的试剂，其包括第一引物探针对、第二引物探针对和第三引物探针对，第一引物探针对为VSV‑G引物和探针对；第二引物探针对为gag引物探针对；第三引物探针对为RPP30引物探针对。本发明还公开了可复制性慢病毒的检测方法，步骤为：S1细胞培养；S2准备待测样品；S3制备标准曲线样品；S4确定所需的反应孔数；S5配制所需的qPCR反应液与引物探针的混合液；S6按要求在反应孔中添加混合液以及标准品、稀释液、阴性质控NCS、待测样品和样品ERC；S7控制各个反应孔的反应过程；S8用分析软件得到每个样品的Ct值及三个靶标的浓度。本发明能降低背景信号值，提高最终信号值，检测灵敏度高，更有利于低浓度的检测。
通道双淬灭探针检测复制病毒试剂及其方法

[发明专利]菌体裂解液澄清试剂以及在质粒提取工艺中的应用-CN202110538295.8在审
发明人：张海峰;陈燕辉;陈凯;隋礼丽;孔令洁 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2021-05-18 - 公布日： 2021-08-17 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种菌体裂解液澄清试剂，其包括高浓度的盐类溶液，盐类溶液中的盐类包括氯化锌、氯化镁、氯化钙、氯化铜、硫酸镁、醋酸钙、醋酸镁、醋酸铵中的一种或几种，将上述盐分按照比例称量，加入水后充分搅拌溶解，调节pH至4.0‑7.2。本发明的菌体裂解液澄清试剂，在菌体裂解后加入到裂解溶液中，静置几小时，通过离心或澄清过滤能够除去基因组残留、RNA残留和宿主蛋白残留，简化质粒提取工艺；能避免了采用层析柱层析时，层析柱堵塞而导致层析柱使用寿命缩短的问题；在质粒提取工艺中，菌体裂解后使用，能减少层析次数，既能够减少工艺步骤，提高生产效率，降低生产成本，又能避免层析过程中造成的质粒损耗，提高质粒的回收率。
菌体裂解澄清试剂以及质粒提取工艺中的应用

[实用新型]发酵罐取样装置-CN202022975807.0有效
发明人：尚玉宽;隋礼丽;孔令洁 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2020-12-08 - 公布日： 2021-07-09 - 主分类号： G01N1/14 文献下载
摘要：本实用新型提供一种发酵罐取样装置，包括采样管路、取样头、排空软管和取样器，采样管路为三通管路，一端从发酵罐顶部贯穿且延伸至发酵罐内腔的底部，用于样品的采样；一端通过排空软管连接至发酵罐，用于平衡采样管路与发酵罐内的气压以及吸取发酵罐内气体排空采样管路；一端连接取样头；取样器与取样头连接用于抽取采样管路中发酵液的样品；排空软管上设置软管夹来控制软管的通断。该装置和方法实现将取样管路内的液体排空的作用，同时不会有外界的气体经过取样管路进入待发酵罐内，即取样管路内的所有液体和气体都是来自发酵罐内，且都是经过取样管路向外端的方向流动，在实现排空取样管路的同时，能够最大程度的保证发酵罐不发生污染。
发酵取样装置

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