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[发明专利]异源双链突变载体及其在细菌中的应用-CN99808541.3无效
发明人： R·库马;R·A·梅茨 -专利权人： 金默拉根有限公司
申请日： 1999-05-12 - 公布日： 2001-08-22 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明基于发现重组诱发剂寡核碱基在含有一段链转移活性(RecA)和错配修复活性(MurS)的原核细胞中是有活性的。采用该系统,一类术语为异源双链突变载体的双链突变载体,在原核细胞中表现出比以前所检测的多种类型的突变载体的活性更高。通过将一段核酸酶抗性的寡核苷酸(如四－2’－O－甲基－尿苷)替代四胸苷接头,来连接重组诱发剂的寡核苷酸的两条链并除去含有DNA的插入片段,得到了活性的进一步提高。本权利要求涉及含有以上优点的双链突变载体上。在一个可选的实施例中,本权利要求涉及双链突变载体在原核细胞中的使用。
异源双链突变载体及其细菌中的应用

[发明专利]无细胞嵌合体制备技术和异源双螺旋突变载体的真核应用-CN99808545.6无效
发明人： E·B·克米克;H·B·加姆佩尔;A·D·科勒－斯特劳斯 -专利权人： 金默拉根有限公司
申请日： 1999-05-12 - 公布日： 2001-08-22 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明是以重组诱发性寡核苷酸在含有胞质提取物和质粒上的待测双螺旋DNA的无细胞系统中的反应为基础。在转化的MutS、RecA缺陷型细菌中,所述反应特异性地将突变kanr基因转变恢复成抗性表型,从而能够迅速并定量地比较重组诱发性寡核碱基。利用该系统,一种被称为异源双螺旋突变载体的双螺旋突变载体类型比此前检测的突变载体类型更有活性。此外,通过核酸酶抗性寡核苷酸例如四－2’－O－甲基－尿苷代替四胸苷连接物连接双螺旋突变载体的两条链并除去含DNA的插入片段可以提高活性。权利要求涉及含上述改进的双螺旋突变载体。在另一实施方案中,权利要求涉及含重组诱发性寡核碱基、无细胞酶混合物和含靶序列的双螺旋DNA的反应混合物。在另一实施方案中,本发明涉及利用这种混合物在检测重组诱发性寡核碱基的改进以及检测所述化合物对无细胞酶混合物活性的影响和在靶DNA序列中产生特异性改变方面的应用。
细胞嵌合体制备技术双螺旋突变载体应用

[发明专利]用混合双链寡核苷酸在植物中实现定点遗传改变的用途-CN98809867.9有效
发明人： C·J·阿恩岑;P·B·基普;R·库马;G·D·梅 -专利权人： 金默拉根有限公司
申请日： 1998-08-05 - 公布日： 2000-11-15 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明涉及用大约25—30个碱基对的双链寡核苷酸在植物细胞中导入位点专一性遗传改变的用途。所述寡核苷酸可以通过机械(biolistic)系统输送或通过对植物原生质体进行电穿孔输送。然后,可以从所述改变过的细胞产生具有所述遗传改变的植物。在具体实施方案中,本发明涉及编码酸性转化酶、UDP－葡萄糖焦磷酸化酶、多酚氧化酶、O－甲基转移酶、肉桂醇脱氢酶、ACC合酶和ACC氧化酶或etr－1或etr－1的同系物的基因的改变,以及在所述基因上具有分离的点突变的植物。
混合寡核苷酸植物实现定点遗传改变用途