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[发明专利]一种提高桑黄胞内多酚积累量的方法-CN202110738974.X有效
发明人：赵艳霞;郑维发;袁雯雯;孙梦妮;周蓉 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2021-06-30 - 公布日： 2023-09-26 - 主分类号： C12N1/38 文献下载
摘要：利用不饱和脂肪酸提升桑黄胞内多酚积累的方法，包括：将固体培养的桑黄切割成小块，转移至发酵培养基中，在恒温摇床中培养，取出摇瓶，在无菌条件下充分打碎，继续放置于恒温摇床中培养，得母液用于后续液体发酵。向发酵桑黄的培养液中加入不饱和脂肪酸。本发明在桑黄发酵培养时以不饱和脂肪酸为激发子，可显著提高桑黄生物量的积累和硬毛素类多酚产量。
一种提高桑黄胞内多酚积累方法

[发明专利]一种生产米黑根毛霉脂肪酶酶粉的工程菌株及其应用-CN201811092263.4有效
发明人：黄金金;黄蓉;马艳;郑维发 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2018-09-19 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：一种生产米黑根毛霉脂肪酶酶粉的工程菌株的构建方法，将含前导肽的脂肪酶基因pro‑rml插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZα+Mα上构建得到含2拷贝目的基因的表达载体pPICZα+Mα‑2prorml。将含有2拷贝的目的基因的表达载体分别转到巴斯德毕赤酵母中并筛选获得含4拷贝数目的基因的能够表达Pro‑RML的基因工程菌mα‑4pRML‑X33。一种制备米黑根毛霉脂肪酶酶粉的方法，采用过表达转录调控因子HAC1的4拷贝脂肪酶基因的毕赤酵母菌株进行发酵，酶活达到1078U/mL。将该菌株产生的发酵液用丙酮制备酶粉。当发酵液pH调整到4.0，丙酮和发酵液的体积比为2:1，40mL发酵液获得酶粉的重量为1.0116g，酶粉的比活为7936.5U/g，酶粉的回收率为37.935％。为该酶的储存、运输和使用提供新的方式。
一种生产根毛脂肪酶工程菌株及其应用

[发明专利]土元粉在促进桦褐孔菌生长并诱导多酚积累上的应用-CN202011113144.X有效
发明人：赵艳霞;郑维发;袁雯雯;孙梦妮 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2020-10-17 - 公布日： 2022-01-14 - 主分类号： C12N1/38 文献下载
摘要：本发明涉及真菌发酵应用领域，公开了土元粉在促进桦褐孔菌生长并诱导多酚积累上的应用。具体为固体或液体发酵培养条件下，在培养基中添加土元粉促进桦褐孔菌生长并诱导多酚类化合物积累的应用。针对野生桦褐孔菌生长在寒冷地区，自然条件下生长极为缓慢，人工培养桦褐孔多酚类化合物积累甚微，均无法满足生产的需求等问题，本发明采取固体或液体发酵方法，模拟生态环境开展昆虫激发子对桦褐孔菌生长发育、多酚积累和抗氧化活性的调控研究，为解决桦褐孔菌菌丝体和多酚类化合物的原料来源奠定基础。
土元粉促进桦褐孔菌生长诱导积累应用

[发明专利]一种生产米黑根毛霉脂肪酶mRML酶粉的方法-CN201811092251.1有效
发明人：黄金金;赵庆伊;陈凌霄;卜伟;叶梦奇;郑维发 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2018-09-19 - 公布日： 2021-08-10 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：一种生产米黑根毛霉脂肪酶mRML酶粉的方法，包括步骤：构建含脂肪酶基因mrml的能够表达mRML的工程菌株；培养工程菌株；经诱导表达获得含米黑根毛霉脂肪酶mRML的发酵液；将发酵液离心，取上清，调节pH至7.0，之后置于低温环境中，直至上清液表面出现结冰；向上清液中加入预冷丙酮，静置，弃上清，收集沉淀；风干沉淀，得米黑根毛霉脂肪酶mRML酶粉。本发明的一种生产米黑根毛霉脂肪酶mRML酶粉的方法，以50mL发酵液为研究对象，丙酮和发酵液的体积比为2:1，当发酵液pH调到5.0‑7.0，酶活回收率保持在70％以上。当发酵液pH为7.0时，酶回收率最高，获得酶粉的重量为1.373g，酶粉的比活为3367U/g，酶粉的回收率为94.4％，明显优于现有的生产方法。
一种生产根毛脂肪酶 mrml 方法

[发明专利]一种生产米黑根毛霉脂肪酶pRML酶粉的方法-CN201811092258.3有效
发明人：黄金金;马艳;黄蓉;卜伟;叶梦奇;郑维发 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2018-09-19 - 公布日： 2021-08-06 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：一种生产米黑根毛霉脂肪酶pRML酶粉的方法，包括步骤：构建含4拷贝数脂肪酶基因pro‑rml的能够表达Pro‑RML的工程菌株；培养工程菌株；经诱导表达获得含米黑根毛霉脂肪酶的发酵液；将发酵液离心，取上清，调节pH至8.0，之后置于低温环境中，直至上清液表面出现结冰；向上清液中加入预冷丙酮，静置，弃上清，收集沉淀；风干沉淀得米黑根毛霉脂肪酶pRML酶粉。本发明的一种生产米黑根毛霉脂肪酶pRML酶粉的方法，以40mL发酵液为研究对象，将其pH调到8.0，丙酮和发酵液的体积比为2:1，获得酶粉的重量为1.5029g，酶粉的比活为13227.5U/g，酶粉的回收率为93.9％，为该酶的储存、运输和使用提供新的方式。
一种生产根毛脂肪酶 prml 方法

[发明专利]一株胞外分泌表达桦褐孔菌二肽酶的工程菌-CN201810575876.7有效
发明人：黄金金;郑维发;王艳 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2018-06-06 - 公布日： 2021-04-27 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：一株胞外分泌表达桦褐孔菌二肽酶的工程菌，通过利用克隆的桦褐孔菌去跨膜区的二肽酶基因IDP与表达载体可操作地连接，得到能够表达该蛋白的重组表达载体，并将上述重组表达载体导入恰当的宿主细胞中而获得。本发明还提供一种制备上述IDP的方法，其是通过培养IDP‑X33，经甲醇诱导表达获得桦褐孔菌去跨膜区的二肽酶IDP。所述培养条件为28℃，初始pH为7，200rpm培养96小时。所述诱导条件为每24小时补充一次诱导物甲醇，至甲醇终浓度为1.0％。本发明的提供的重组毕赤酵母表达二肽酶方法，胞外分泌酶活达到24U/mL，细胞密度(OD600)为24.5，酶的分泌效率为1U/mL。
一株胞外分泌表达桦褐孔菌二肽酶工程

[发明专利]粗糙脉孢菌发酵秸秆高产麦角甾醇的方法-CN201710759725.2有效
发明人：赵艳霞;郑维发;殷澜;袁卫华;张朋;胡萍;黄文秀 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2017-08-29 - 公布日： 2020-10-23 - 主分类号： C12P33/00 文献下载
摘要：本发明涉及发酵工程领域，具体涉及一种粗糙脉孢菌发酵秸秆高产麦角甾醇的方法。该方法利用小麦秸秆或水稻秸秆作为营养来源，该方法是粗糙脉孢菌以小麦秸秆、水稻秸秆为唯一营养源生产麦角甾醇，该方法包括：粗糙脉孢菌菌种的富集、粗糙脉孢菌的大量培养、麦角甾醇的提取、麦角甾醇的纯化四个步骤。该方法直接利用成本低廉的秸秆作为营养源，快速培养粗糙脉孢菌，获得大量的、高纯度的化合物麦角甾醇。
粗糙脉孢菌发酵秸秆高产麦角方法

[发明专利]一种生产米黑根毛霉脂肪酶mRML酶粉的工程菌株及其构建方法-CN201811092260.0在审
发明人：黄金金;陈凌霄;赵庆伊;郑维发 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2018-09-19 - 公布日： 2020-03-27 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：一种生产米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)脂肪酶mRML酶粉的工程菌株及其构建方法，将含前导肽的脂肪酶基因mrml插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZα+Mα上构建得到含目的基因的表达载体pPICZαA‑mrml，将含有目的基因的表达载体转到巴斯德毕赤酵母X‑33中并筛选获得含mrml基因的能够表达mRML的工程菌zα‑mRML‑X33。将上述工程菌株进行摇瓶发酵，胞外酶活为98U/mL。将该菌株产生的发酵液用丙酮制备酶粉，当发酵液pH调整到5.0‑7.0，丙酮和发酵液的体积比为2:1时，酶活回收率保持在70％以上。当发酵液pH为7.0时，酶回收率最高，获得酶粉的重量为1.373g，酶粉的比活为3367U/g，酶粉的回收率为94.4％。为该酶的储存、运输和使用提供新的方式。
一种生产根毛脂肪酶 mrml 工程菌株及其构建方法

[发明专利]一株呋喃香豆素基因转化的杀虫工程菌株及其应用-CN201710498589.6在审
发明人：赵艳霞;郑维发;黄文秀;袁卫华;胡萍;殷澜;张朋;黄金金 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2017-06-26 - 公布日： 2017-11-14 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：本发明提供了一株可大量合成呋喃香豆素的构巢曲霉重组菌株，构巢曲霉重组菌株培养方法简单，成本低廉，此外其粗提产物具有较强的杀虫效率，并且产物提取方法简单，可有效用于昆虫的防治。具有广泛的实用价值和经济价值。
呋喃香豆素基因转化杀虫工程菌株及其应用

[发明专利]紫苏挥发油的制备及作为食品防腐剂在水果储藏中的应用-CN201510107907.2在审
发明人：田俊;王炎真;彭学;房兴堂;郑维发;周郑坤;李宗芸 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2015-03-12 - 公布日： 2015-07-22 - 主分类号： A23B7/154 文献下载
摘要：一种紫苏挥发油的制备及作为食品防腐剂在水果储藏中的应用，属于防腐抑菌剂的制备及应用。紫苏挥发油的制备方法如下：待紫苏阴干后，将干燥的紫苏地上部位粉碎，过40-200目筛，称取300-500g过筛后的粉碎物，加入1:5-1:10比例的蒸馏水，蒸馏，馏出物加入无水硫化钠干燥24h去除水相，得挥发油3-6mL；每100mL挥发油用40g无水硫酸钠干燥，得到紫苏挥发油，于4℃冰箱内密封避光保存。作为食品防腐剂在水果储藏中的应用，在食品储藏空间内，利用紫苏挥发油的挥发特性，进行气相杀菌。优点：本发明为绿色安全的挥发性物质，以其为底物的天然防腐剂与传统防腐剂相比具有安全、高效、使用方便、气相防腐以及无残留等优势的食品防腐剂。
紫苏挥发油制备作为食品防腐剂水果储藏中的应用

[实用新型]清洗控制电路-CN201120548567.4有效
发明人： 郑维发 -专利权人：深圳深爱半导体股份有限公司
申请日： 2011-12-23 - 公布日： 2012-10-17 - 主分类号： B08B3/02 文献下载
摘要：一种清洗控制电路，包括计数器、继电器KS、计时器、喷水电磁阀、放水电磁阀、水位检测模块，其中，所述计数器并联在电源的两端，所述继电器KS的常开开关与计数器的计数启动端并联；所述计时器并联在电源两端，所述喷水电磁阀通过计时器的常开开关并联在电源两端，所述继电器KS的电子线圈与喷水电磁阀并联；所述水位检测模块并联在电源两端，水位检测模块还与计时器的复位端连接；所述放水电磁阀通过计时器的常闭开关与电源连接。上述清洗控制电路，通过水位检测模块，控制喷淋槽内的水位高度，使水位覆盖元件，但不会漫过喷淋槽，将元件清洗干净的同时能够节省水资源。
清洗控制电路

[发明专利]一种发酵培养桦褐孔菌的方法-CN200810227890.4无效
发明人： 郑维发;赵艳霞;缪康杰;张梅梅;魏志文 -专利权人：徐州师范大学
申请日： 2008-12-02 - 公布日： 2010-06-23 - 主分类号： C12P7/22 文献下载
摘要：本发明公开了一种发酵培养桦褐孔菌的方法。本发明发酵培养桦褐孔菌的方法是向桦褐孔菌的培养液中添加无菌的链格孢霉菌细胞壁碎片；所述链格孢霉菌细胞壁碎片是将链格孢霉菌菌丝体破碎后离心得到的。本发明通过向桦褐孔菌的发酵培养的发酵液中加入链格孢霉菌细胞壁碎片来培养桦褐孔菌，获得的桦褐孔菌胞内和胞外的酚类化合物的积累和抗氧化活性明显提高。本发明发酵培养桦褐孔菌的方法中链格孢霉菌细胞壁碎片用量少，制备方法简单，成本低廉，具有广泛的实用价值和经济价值。
一种发酵培养桦褐孔菌方法

[实用新型]扩散氢气互锁装置-CN200820094859.3无效
发明人：康鹏飞;郑维发 -专利权人：深圳深爱半导体有限公司
申请日： 2008-06-17 - 公布日： 2009-04-29 - 主分类号： G05B11/01 文献下载
摘要：本实用新型涉及机电控制领域，公开了一种扩散氢气互锁装置，包括：运放电路101的信号输入端与用于探测热扩散炉温度的S型热电偶连接，接收温度电信号，输出放大后的温度电信号；比较器102的第一输入端与运放电路的输出端连接，第二输入端接入设定的温度电信号，根据放大后的温度电信号、以及设定的温度电信号输出控制信号；驱动开关管103与比较器102的输出端连接，根据控制信号输出驱动信号，控制继电器104的通断；继电器104的输入端与驱动开关管103连接，输出端与氢气阀门105连接，接收驱动信号，控制氢气阀门105的开启或关闭。应用本实用新型实施例的技术方案能够实现根据热扩散炉中的温度控制氢气阀门的开启或关闭。
扩散氢气互锁装置

[发明专利]盐藻的培养方法-CN200610113359.5无效
发明人： 郑维发;杜彩华;陈才法;储成才 -专利权人：江苏省药用植物生物技术重点实验室
申请日： 2006-09-25 - 公布日： 2007-03-07 - 主分类号： C12N1/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种培养盐藻的方法。该方法是将盐藻在接种了芽孢杆菌的培养基中进行培养。实验证明，接种芽孢杆菌后，盐藻的生长速率、生物量及β－胡萝卜素积累量均得到显著提高，生长速率可达4.135×10⁵/天，生物量可达846.88mg·L^－1，β－胡萝卜素积累量可达125.4mg·L^－1。本发明具有成本低，收益大，无污染，操作简单，易于进行规模化养殖的优点，将对盐藻和β－胡萝卜素产业的跨跃式发展起到重要的推动作用，应用前景广阔。
培养方法

[发明专利]盐藻的一种培养方法-CN200610113360.8无效
发明人： 郑维发;杜彩华;陈才法;储成才 -专利权人：江苏省药用植物生物技术重点实验室
申请日： 2006-09-25 - 公布日： 2007-03-07 - 主分类号： C12N1/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种培养盐藻的方法。该方法是在无纤毛虫污染的情况下，向常规培养盐藻的培养基中添加青蒿的水提取物和/或乙醇提取物；在受到纤毛虫污染的情况下，向常规培养盐藻的培养基中添加青蒿的乙醇提取物。本发明不仅解决了盐藻开放式养殖中纤毛虫的污染问题，还具有成本低，收效高，无污染，操作简单的优点，将对盐藻和β－胡萝卜素产业的跨跃式发展起到重要的推动作用，应用前景广阔。
一种培养方法

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