本发明公开了一种小麦矮杆基因Rht8的功能KASP分子标记及其应用。具体地公开了检测小麦Rht8基因的第1649‑1650位核苷酸是否由“CG”突变为“T”的物质在鉴定或辅助鉴定小麦株高性状中的应用。本发明公开了核苷酸序列为SEQ ID No.1和/或2所示的分子标记。本发明提供了所述分子标记的引物组合物、含有所述引物组合物的试剂盒及利用所述引物组合物鉴定小麦株高的方法。本发明的KASP分子标记及其引物能够快速、精准、高通量地鉴定Rht8基因的矮杆等位型,可高效检测和追踪小麦品种/品系中基因Rht8,加快矮杆基因Rht8的高效育种利用,具有准确性高、特异性强、检测简单便捷,经济高效的特点。